《Netrin-1/UNC5H2對腦梗死後自噬調節和神經保護的實驗研究》是依託中山大學，由余劍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Netrin-1/UNC5H2對腦梗死後自噬調節和神經保護的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：余劍
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
新近研究發現腦缺血後自噬增強，並對神經細胞死亡和神經功能恢復有重要影響。在前期國家自然科學基金（30973108）資助下，我們已發現依賴配體netrin-1的條件凋亡受體UNC5H2在腦缺血後呈優勢表達，與自噬和凋亡存在時間和部位的一致，外源性netrin-1可改善這種細胞死亡和神經功能缺損；同時，已證實缺血誘導的p53既可直接調控netrin-1/UNC5H2，又可被後者經自噬信號通路PI3K-AKT反向抑制，進一步提示netrin-1/UNC5H2可能參與腦缺血後的自噬調節。本課題在前期基礎上，體內套用UNC5H2/Fc融合蛋白的免疫粘附策略，體外套用UNC5H2 siRNA，干擾內源性UNC5H2功能；同時，套用LY294002抑制PI3K-AKT信號，觀察缺血損傷後netrin-1/UNC5H2對自噬調節和神經保護的作用和機制。研究結果對臨床促進卒中後的神經功能恢復有重要意義。
結題摘要
腦卒中後產生一系列神經和血管可塑性反應，但其機制未明。新近研究發現腦缺血後自噬增強，並對神經細胞死亡、血管再生和神經功能恢復有重要影響。在前期國家自然科學基金資助下，我們已發現依賴配體netrin-1的條件凋亡受體UNC5H2在腦缺血後呈優勢表達，與自噬和凋亡存在時間和部位的一致，外源性netrin-1可改善這種細胞死亡和神經功能缺損；同時，已證實缺血誘導的p53既可直接調控netrin-1/UNC5H2，又可被後者經自噬信號通路PI3K-AKT反向抑制，因此，我們假設netrin-1/UNC5H2可能參與腦缺血後的自噬調節。 本課題體內觀察netrin-1對大鼠腦梗死後遠隔丘腦血腦屏障的保護作用和對神經功能的影響；體外觀察netrin-1對氧糖剝奪後大鼠腦微血管內皮細胞和神經母細胞瘤細胞存活的作用，以及對自噬活性的影響。同時，作為腦卒中後神經和血管可塑性的一部分，我們也觀察了軟骨素酶ABC對腦梗死後神經保護，以及自噬相關蛋白beclin-1在血管新生內膜中的作用和機制。 結果發現：（1）Netrin-1側腦室注射（600ng/d，持續7天）可減輕腦卒中後遠隔丘腦的繼發性血腦屏障損害並改善神經功能，促進內皮緊密連線功能和內皮細胞生存是其主要機制，且這種保護作用可能經由受體UNC5H2介導的PI3K自噬激活而實現。（2）Netrin-1在體外促進氧糖剝奪後人神經母細胞瘤細胞的存活，這種作用可能經其受體UNC5H2介導的自噬降低而實現。（3）軟骨素酶ABC腦梗死灶內注射可減輕病灶局部和遠隔丘腦部位的損害，這種作用可能經由抑制腦梗死後形成的神經抑制性環境而實現。（4）自噬調節蛋白beclin-1敲低加重大鼠頸動脈損害後的新生內膜形成，由於細胞自噬抑制和凋亡增強而導致的再內皮化延遲可能是其機制之一。 本項目共發表相關論文9篇，其中，SCI論文4篇，SCI論文摘要1篇，國核心心期刊4篇，參與國際會議交流1次，參與國內會議交流5次，共培養碩士研究生8人。研究結果對臨床促進卒中後神經功能恢復和改善血管可塑性有重要意義。
