《Nedd4-2/ClC-2泛素化信號通路在內側顳葉癲癇發病機制中的作用》是依託中南大學，由吳麗文擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Nedd4-2/ClC-2泛素化信號通路在內側顳葉癲癇發病機制中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：吳麗文
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本項目通過建立內側顳葉癲癇（MTLE）大鼠模型及海馬神經元癲癇細胞模型，採用免疫共沉澱、螢光免疫雙標、雷射共聚焦、shRNA基因沉默技術、質粒轉染、膜片鉗等方法，從在體和離體兩個方面全面探討了泛素化在MTLE癲癇形成（epileptogenesis）中的重要作用，並闡明E3連線酶Nedd4-2通過調控氯離子通道ClC-2的活性、分布和表達而影響神經元癇樣放電。本研究首次探討泛素化與MTLE形成的關係，並開創性地提出Nedd4-2/ClC-2信號通路調控MTLE的形成及神經元癇樣放電；將從一個全新角度深入探討泛素化參與MTLE發病的調控機制，為MTLE發病機制的研究打開新的視角，為尋求新的抗癲癇藥物研發靶點提供理論依據。
結題摘要
內側顳葉癲癇（MTLE）發病機制複雜，治療困難，全面探討MTLE的發病機制，尋求新的藥物治療靶點，是目前MTLE研究的重點和難點。泛素-蛋白酶體途徑（UPS）是一種高效的蛋白分解途徑，其生物學作用非常廣泛。近年來發現，UPS在癲癇的形成和發展中也充當重要角色。那么，探討UPS是否在MTLE發病機制中是否發揮作用、怎樣發揮作用，將為MTLE發病機制的研究提供一個新的視角。 本研究分為兩部分：1、建立幼鼠MTLE模型，利用shRNA基因沉默技術、雷射顯微共聚焦、免疫共沉澱、pull down、免疫螢光等一系列先進的研究技術，確認UPS在MTLE發病機制中發揮重要作用，抑制UPS可以加速MTLE模型大鼠癲癇發生。2、建立原代培養的新生大鼠海馬神經元癲癇細胞模型，利用質粒轉染、膜片鉗等技術，首次發現在MTLE中，Nedd4-2是具有關鍵作用的UPS的E3連線酶，通過調控下游產物氯離子通道ClC-2調控神經元放電。 本研究通過在體動物模型和離體細胞模型，首次發現了泛素化與MTLE癲癇形成的關係，進一步探討了Nedd4-2/ClC-2信號通路在調控癲癇神經元放電中的作用機制。從一個全新的角度探討了MTLE的發病機制，為尋求新的抗癲癇藥物研發靶點理論依據。
