《NRBP2對肝癌幹細胞分化的調控及分子機制研究》是依託上海交通大學，由張立行擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：NRBP2對肝癌幹細胞分化的調控及分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張立行
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤幹細胞對腫瘤的發生髮展具有重要的促進作用，並且與腫瘤的復發和轉移密切相關。分化治療策略是通過誘導腫瘤幹細胞分化，從而抑制腫瘤幹細胞的惡性。我們先前的研究發現BMP4可以誘導CD133+肝癌幹細胞分化。隨後我們通過基因晶片分析，發現這一過程中NRBP2的表達具有顯著改變。BMP4處理後肝癌細胞中NRBP2的表達增高，且呈時間依賴性；NRBP2在CD133-肝癌細胞中的表達高於CD133+細胞；干擾NRBP2基因表達會導致肝癌細胞中乾性相關基因的表達增高。上述結果提示NRBP2與肝癌幹細胞分化密切相關，但是其影響肝癌幹細胞分化的分子機制並不明確。本研究擬結合肝癌患者臨床標本，探索NRBP2與肝癌組織分化程度之間的相關性，並進一步明確NRBP2在肝癌幹細胞分化中的功能，探討NRBP2影響肝癌細胞分化的分子機制，為闡明肝癌幹細胞分化機理提供實驗依據，同時也為肝癌的預後判斷提供分子標誌。
結題摘要
系統性化療是晚期肝細胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）患者治療的主要治療選項，而耐藥是導致HCC病人死亡的主要原因。最近的研究顯示，腫瘤幹細胞（Cancer stem cell, CSC）參與腫瘤的起始並在耐藥中發揮重要作用。我們之前發現，利用BMP4誘導HCC中CD133+ CSCs發生分化，可以抑制CSCs的成瘤和耐藥能力。在本項目中，通過分析誘導分化前後的HCC細胞中基因表達變化，我們發現核受體結合蛋白2（Nuclear receptor binding protein 2, NRBP2）基因在BMP4處理後表達增高。229例被檢測的HCC組織和對應癌旁正常組織中，NRBP2在159例（69.43%）HCC組織中表達下調，67例（29.26%）表達無明顯變化，僅在3例（1.31%）中表達增高。NRBP2表達與HCC患者腫瘤組織學分級呈負相關，NRBP2表達越低的患者預後越差。過表達NRBP2的HCC細胞中乾性相關基因如Nanog、Oct3/4等表達下調，干擾NRBP2表達後這些基因則表達上調，NRBP2低表達細胞中富集了CSC細胞群。NRBP2高表達會抑制HCC的體外增殖、自我更新和體內成瘤能力，同時增強目前的一線化療藥物Sorafenib在HCC細胞中的生長抑制和促凋亡作用。生物信息學分析及體外實驗的結果則顯示，NRBP2高表達增強了HCC細胞對於Cisplatin和Akt抑制劑Perifosine的化療敏感性。機制方面，NRBP2可以與Annexin A2（ANXA2）蛋白結合，並抑制ANXA2蛋白的表達。在過表達NRBP2基因的HCC細胞中同時過表達ANXA2，可以使得NRBP2過表達細胞的化療藥物敏感性、自我更新能力以及Akt磷酸化水平得以恢復。同時，我們發現NRBP2對HCC細胞化療藥物耐受能力的調控與其對Akt和Bcl2信號通路相關蛋白的表達有關。Perifosine處理可以抑制HCC細胞中乾性相關基因表達和CD133+ CSCs在體外的自我更新，提示Perifosine可能也是HCC中CSCs的抑制劑。綜上所述，我們的研究結果顯示，結合在HCC組織中檢測NRBP2的表達水平與Perifosine的選擇使用，可能成為克服HCC病人化療耐藥的一種具有較好套用前景的治療策略。
