《NR2B-CaMKⅡα-HDAC4 shuttling 信號通路在瑞芬太尼痛覺過敏中的調控機制》是依託天津醫科大學，由王春艷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：NR2B-CaMKⅡα-HDAC4 shuttling 信號通路在瑞芬太尼痛覺過敏中的調控機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王春艷
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
瑞芬太尼誘發的痛覺過敏（RIH）臨床常見，尚無可靠治療方法。課題組前期工作（發表於Anesthesiology和A&A等）證實NMDA受體NR2B trafficking在RIH中發揮重要調控作用，但其下游機制尚未明確。新近文獻證實NR2B可調控CaMKⅡα磷酸化水平，參與脊髓LTP形成與維持。HDAC4胞核和胞漿shuttling在突觸可塑性及疼痛記憶中發揮重要作用，且受NMDAR和CaMKⅡα調控。本研究擬建立在體大鼠瑞芬太尼痛覺過敏模型，利用疼痛行為學、western blot、免疫螢光、共沉澱、免疫電鏡和高爾基染色等方法探討NR2B、CaMKⅡα、HDAC4及樹突棘形態在RIH中的動態變化；進一步培養大鼠脊髓背角神經元，建立離體RIH模型，利用全細胞膜片鉗等技術，研究NR2B-CaMKⅡα-HDAC4 通路在RIH中的調控機制。本研究將為瑞芬太尼痛覺過敏的臨床防治提供新思路。
結題摘要
瑞芬太尼引發的痛覺過敏臨床常見，尚無可靠治療方法。課題組前期工作證實了NMDA 受體trafficking對瑞芬太尼痛覺過敏的調控機制，但對於NMDA受體何種亞單位及其下游機制在瑞芬太尼痛覺過敏中的作用，並未做討論。本研究製作在體SD 大鼠瑞芬太尼痛覺過敏模型，利用機械性痛閾、熱痛敏測定、western blot、免疫螢光、免疫電鏡等研究NMDA受體NR2B、CaMKⅡα及HDAC4在瑞芬太尼痛覺過敏中動態變化；並培養大鼠脊髓背角神經元，利用NR2B拮抗劑、CaMKⅡα抑制劑，研究NMDA受體NR2B-CaMKⅡα-HDAC4通路在瑞芬太尼痛覺過敏中調控機制。研究結果顯示：1.輸注瑞芬太尼誘發大鼠機械痛敏和熱痛敏，該組脊髓背角pNR2B、pCaMKⅡα、HDAC4表達增加，NR2B/CaMKⅡα二聚體表達增加，脊髓背角神經元胞質中HDAC4表達增加，證實HDAC4發生〈胞漿穿梭改變（shuttling），且脊髓背角神經元樹突棘密度顯著增加；2. 套用NR2B選擇性抑制劑Ro 25-6981、CaMKⅡα選擇性抑制劑KN-93後，可以抑制輸注瑞芬太尼誘發的大鼠機械痛敏和熱痛敏，降低瑞芬太尼引起的pNR2B、pCaMKⅡα、HDAC4及NR2B/CaMKⅡα二聚體表達量的增加，抑制HDAC4 穿梭改變（shuttling），抑制脊髓背角神經元樹突棘密度增加。瑞芬太尼可能是通過增加NR2B亞單位膜上表達，進而增強NMDAR介導的鈣電流，激活CaMKⅡα，並促使HDAC4磷酸化，並由核內向細胞質中穿梭（shuttling），促使影響突觸可塑性的目的基因的轉錄和表達，進而誘發痛覺過敏。本研究將為瑞芬太尼痛覺過敏現象的臨床防治提供新的診療思路。
