NASBA全稱：nucleic acid sequence-based amplification ,依賴核酸序列的擴增技術依賴核酸序列的擴增技術,是一種擴增RNA的新技術,是由一對引物介導的、連續均一的、體外特異核苷酸序列等溫擴增的酶促反應過程.反應在42℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約10^9～12倍,不需特殊的儀器.NASBA已經廣泛套用於細菌、病毒等多種病原微生物的檢測.
最早在1991年，被 J Compton 定義為：a primer-dependent technology that can be used for the continuous amplification of nucleic acids in a single mixture at one temperature
該技術一出現就被用於疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。
儘管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術（通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢：可以在相對恆溫的條件下進行（一般恆溫為41攝氏度）。
該技術用於醫學診斷，相對傳統的PCR技術更為穩定，準確。
基本介紹
- 外文名：NASBA (molecular biology)
- 技術：依賴核酸序列的擴增技術
- 1991年：被 J Compton 定義
- 特點：PCR技術更為穩定，準確
簡要過程,參考文獻,
簡要過程
NASBA的簡要過程 如下：
1.RNA模板鏈進入反應混合物後，第一個引物首先與模板鏈的3'端結束
2. 反轉錄酶，合成反義，補償的DNA鏈
3. RNA 酶H，分解破壞RNA模板鏈（僅分解與DNA雜交結合的RNA鏈，不分解單鏈RNA）
4.第二個引物與DNA的5‘端結合
5.T7 RNA polymerase 合成RNA補償鏈，並加入到步驟1中，使反應可以循環進行。
NASBA技術已經被用於多個單鏈RNA基因組的病原性病毒的快速檢測試驗中，e.g. influenza A, foot-and-mouth disease virus, severe acute respiratory syndrome (SARS)-associated coronavirus, Human bocavirus(HBoV) and also parasites like Trypanosoma brucei.
參考文獻
"Real-time nucleic acid sequence-based amplification is more convenient than real-time PCR for quantification of Plasmodium falciparum". Journal of clinical microbiology43 (1): 402–5. doi:10.1128/JCM.43.1.402-405.2005. PMC540116. PMID15635001.Collins, RA; Ko, LS; So, KL; Ellis, T; Lau, LT; Yu, AC (2002).
"Detection of highly pathogenic and low pathogenic avian influenza subtype H5 (Eurasian lineage) using NASBA". Journal of virological methods103 (2): 213–25. PMID12008015.^Collins, RA; Ko, LS; Fung, KY; Lau, LT; Xing, J; Yu, AC (2002). "A method to detect major serotypes of foot-and-mouth disease virus". Biochemical and biophysical research communications297 (2): 267–74. PMID12237113.^Keightley, MC; Sillekens, P; Schippers, W; Rinaldo, C; George, KS (2005).
