《N-WASP對人喉鱗癌細胞放射敏感性的調節作用及其機制研究》是依託武漢大學，由徐禹擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：N-WASP對人喉鱗癌細胞放射敏感性的調節作用及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：徐禹
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
放射治療是喉鱗癌的主要治療手段之一，但產生放射抗拒是阻礙進一步提高中晚期患者療效的重要原因。我們前期研究發現，在放射敏感人喉鱗癌細胞Hep-2中，Wiskott-Ardrich綜合症蛋白（WASP）家族成員N-WASP，在mRNA水平和蛋達水平，其表達均顯著高於同源放射抗拒Hep-2R細胞；據此，我們提出假設：N-WASP可能與喉鱗癌細胞放射敏感性有關，國內外尚未見文獻報導。本課題擬在前期研究基礎上，採用基因干擾技術和過表達技術作為平行手段，分別在細胞水平（體外）和動物水平（體內），觀察N-WASP對人喉鱗癌細胞放射敏感性的影響；同時，採用信號傳導通路關鍵分子的小分子抑制劑，篩選N-WASP調節喉鱗癌細胞放射敏感性依賴的信號傳導通路，闡釋可能的分子機制。期望通過本研究，可明確N-WASP表達水平對喉鱗癌細胞放射敏感性的調節作用及機制，為喉鱗癌的放射增敏治療提供新靶點和新思路。
結題摘要
放射治療是惡性腫瘤的主要治療手段之一，但產生放射抗拒是阻礙進一步提高中晚期患者療效的重要原因。我們前期研究發現，在放射敏感人腫瘤細胞Hep-2 中，Wiskott-Ardrich 綜合症蛋白（WASP）家族成員N-WASP，在mRNA 水平和蛋白水平，其表達均顯著高於同源放射抗拒Hep-2R細胞；據此，我們提出假設：N-WASP 可能與腫瘤細胞放射敏感性有關，國內外尚未見文獻報導. 本課題在前期研究基礎上，採用基因干擾技術和過表達技術作為平行手段，建立穩定N-WASP低表達和過表達細胞株，觀察N-WASP 對腫瘤細胞放射敏感性的影響；結果發現：低表達N-WASP可顯著降低腫瘤細胞放射敏感性，高表達N-WASP可逆轉腫瘤細胞放射抗拒；為闡釋其可能的分子機制，採用基於基因晶片技術的Signaling pathway array方法，結果發現：與對照組相比， N-WASP表達下調可致138個基因表達上調，83個基因表達下調；通過western bolt驗證發現，N-WASP表達下調可使CDKN1C、JUN、RAP1A、 IGFBP3、WNT5A表達下調， CDK6、DUSP5表達上調；採用基於I-TRAQ技術的定量蛋白質組學方法，發現：與對照組相比， N-WASP表達下調可致79個蛋白分子表達上調，167個蛋白分子表達下調。 同時，檢測了N-WASP表達水平對腫瘤細胞增殖、侵襲、遷移能力的影響，結果發現：N-WASP表達水平對腫瘤細胞增殖無明顯影響；但是N-WASP低表達可顯著降低腫瘤細胞侵襲遷移能力；反之，N-WASP高表達可顯著增強腫瘤細胞侵襲遷移能力；採用Intracellular signaling array技術，發現N-WASP對腫瘤細胞侵襲轉移的促進作用可能是通過調控p38 MAPKs信號轉導通路實現的；進一步選用p38 MAPKs信號通路中p38的選擇性抑制劑（SB203580）作用於N-WASP過表達腫瘤細胞，結果發現：N-WASP過表達可增加p38的磷酸化水平，促進腫瘤細胞侵襲轉移，該作用可被SB203580阻斷，證實N-WASP對腫瘤細胞侵襲轉移的促進作用是通過激活p38實現的。 通過本研究，初步明確了N-WASP 表達水平對腫瘤細胞放射敏感性及侵襲遷移能力的調節作用及機制，為惡性腫瘤放射增敏及侵襲轉移的治療提供新靶點和新思路。
