Mis18 複合物的結構與功能研究

《Mis18 複合物的結構與功能研究》是依託中國科學技術大學，由臧建業擔任項目負責人的聯合基金項目。

基本介紹

• 中文名：Mis18 複合物的結構與功能研究
• 項目類別：聯合基金項目
• 項目負責人：臧建業
• 依託單位：中國科學技術大學

中文摘要

在細胞有絲分裂過程中，將姐妹染色單體準確地分配到兩個子代細胞中，對於遺傳信息的正確傳遞、器官的正常發育和個體的健康存活都至關重要。由Cenp-A核小體作為表觀遺傳標記確定的著絲粒結構在該過程中起著關鍵的作用，其功能異常將導致腫瘤等多種疾病。Mis18複合物調控著Cenp-A核小體在染色質上的組裝，對於著絲粒在子代細胞中的染色質上的精確複製極為重要。研究Mis18複合物的結構與功能，能加深對Cenp-A核小體的組裝、著絲粒的精確複製以及基因組穩定性的維持等複雜生物學過程的分子機理的理解。本項目將開展對Mis18複合物的結構與功能研究，測定2-3 個Mis18複合物亞基的單體結構、1-2 個亞複合物的結構，分析各亞基間的相互作用關係，結合其它生物化學、分子生物學、細胞生物學等的研究，闡明Mis18複合物組裝機制及其對Cenp-A核小體在染色質上組裝調控的機理，發表2-4 篇高水平SCI 論文。

結題摘要

在細胞有絲分裂過程中，將姐妹染色單體準確地分配到兩個子代細胞中，對於遺傳信息的正確傳遞、器官的正常發育和個體的健康存活都至關重要。CENP-A核小體作為表觀遺傳標記決定了著絲粒在染色體上的位置。著絲粒結構的建立是姐妹染色單體準確分離的前提，其功能異常將導致腫瘤等多種疾病。Mis18複合物調控CENP-A核小體在染色質上的組裝，對於著絲粒在子代細胞中的染色質上的精確複製極為重要。研究Mis18複合物的結構與功能，能加深對CENP-A核小體的組裝、著絲粒的精確複製以及基因組穩定性的維持等複雜生物學過程的分子機理的理解。本項目將開展對Mis18複合物的結構與功能研究，測定2-3個Mis18複合物亞基的單體結構、1-2個亞複合物的結構，分析各亞基間的相互作用關係，結合其它生物化學、分子生物學、細胞生物學等的研究，闡明Mis18複合物組裝機制及其對CENP-A核小體在染色質上組裝調控的機理，發表2-4篇高水平SCI 論文。 在本項目資助下，我們完成了裂殖酵母Mis18的克隆、表達、純化，完成了Mis18核心結構域的結構測定；完成了Mis18與組蛋白H2A-H2B的相互作用驗證，發現Mis18通過表面負電區與組蛋白結合，負電區的突變顯著減弱了Mis18在著絲粒的定位，並進一步減弱了Cnp1（裂殖酵母中CENP-A的同源蛋白）的定位，影響有絲分裂的進程；完成了裂殖酵母Mis18/19/16三元複合物的表達、純化及晶體篩選，完成了對Mis18/19/16複合物的電鏡負染結果檢測；驗證了Mis18與Mis19、Cnp3的相互作用，發現Mis18通過C-端尾巴結合Mis19，通過核心結構域與Cnp3結合。項目資助期間，發表標註資助號的SCI 論文10 篇；與多個實驗室開展合作研究，促進研究工作的進展；有3名碩士畢業，獲得碩士學位，4名博士畢業，獲得博士學位。