《Miro調控的線粒體移動在癲癇神經損傷中的作用及機制》是依託鄭州大學，由連亞軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Miro調控的線粒體移動在癲癇神經損傷中的作用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：連亞軍
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
癲癇發作後線粒體受損導致神經元對癇性損傷更敏感，及時清除受損線粒體和維持線粒體正常功能至關重要。線粒體移動在清除受損線粒體和維持線粒體正常功能中發揮重要作用，但其在癲癇神經損傷中的作用及機制目前並不清楚。最近研究發現線粒體移動蛋白Miro線上粒體移動中發揮重要作用。而我們前期研究發現癲癇大鼠海馬Miro1水平明顯降低，因此推測Miro1可能通過對線粒體移動的調控進而影響癲癇的發生髮展。為了證明這一假說，我們將利用體外培養海馬神經元癲癇放電及PILO誘導的大鼠顳葉癲癇模型，構建腺病毒載體干預Miro1表達，採用分子生物學、雷射共聚焦、電鏡等技術觀察對線粒體移動、線粒體損傷和細胞凋亡的影響。再給予調控NO變化（L-NAME或SNP）和[Ca2+]i變化（FK506或CsA），進一步探討Miro1調控線粒體移動的機制。本課題將從新的視覺闡明癲癇神經損傷的分子機制，為癲癇治療提供新的靶點。
結題摘要
癲癇發作後線粒體受損導致神經元對癇性損傷更敏感，線粒體移動在清除受損線粒體和維持線粒體正常功能中發揮重要作用。最近研究發現線粒體移動蛋白Miro1線上粒體移動中發揮重要作用。本研究利用體外培養海馬神經元癲癇放電及PILO誘導的小鼠顳葉癲癇模型，通過構建腺病毒載體干預Miro1表達，採用分子生物學、免疫組化等觀察對線粒體損傷、氧化應激和細胞凋亡等影響，深入探討了Miro1調控的線粒體移動在癲癇神經損傷中的作用及機制。課題進展順利，相關成果已以通訊作者發表SCI文章12篇，其中最高影響因子 6.19。中文核心文章11篇。研究結果如下： 1．在PILO誘導癲癇小鼠模型中，發現海馬組織Miro1 mRNA以及蛋白表達水平均明顯降低，並進一步構建腺病毒真核表達質粒干預Miro1表達發現： （1）Miro1過表達能夠有效抑制癲癇引起的海馬組織MDA累積，同時升高Mn-SOD及GSH-Px的活性，並有效提高海馬組織中ND6水平； （2）Miro1過表達能夠降低海馬組織caspase-3，caspase-9，cleaved caspase-3，cleaved caspase-9表達水平，並明顯減少海馬神經元細胞凋亡； 2．在無鎂誘導海馬神經元癲癇模型中，構建腺病毒真核表達質粒干預Miro1表達發現： （1）Miro1過表達能夠降低海馬神經元Bax和caspase-3表達水平，提高Bcl-2表達水平，並明顯減少海馬神經元細胞凋亡； （2）抑制Miro1表達可升高海馬神經元Bax和caspasae-3表達水平，降低Bcl-2表達水平，並明顯增加海馬神經元細胞凋亡； （3）抑制Miro1表達可使ND6蛋白水平降低，MDA蛋白水平升高，GSH蛋白水平降低，從而使海馬神經元氧化應激損傷加重。 綜上所述，本課題深入研究了Miro1調控的線粒體移動在癲癇神經損傷中的作用及機制，為抗癲癇治療提供了新的靶點。
