《MiR-5096 通過激活星形膠質細胞促進膠質瘤侵襲的機制研究》是依託廈門大學，由洪曉婷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-5096 通過激活星形膠質細胞促進膠質瘤侵襲的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：洪曉婷
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
膠質瘤侵襲性生長的特性是其復發率高預後差的關鍵。研究發現膠質瘤周邊的星形膠質細胞被激活而促進膠質瘤的侵襲但機制不明。我們的前期工作證實星形膠質細胞的激活及促侵襲作用與膠質瘤細胞中miR-5096向星形膠質細胞傳遞相關，但miR-5096的下游機制仍待探索。生物信息學分析提示miR-5096可能調控細胞縫隙連線、旁分泌通路及外泌體等細胞間相互作用途徑。本項目將首先在miR-5096激活的星形膠質細胞中分別檢測及改變此三條通路的功能，觀察對膠質瘤侵襲能力的影響，從而分析miR-5096激活星形膠質細胞後調控膠質瘤侵襲的內在機制，並運用報告基因等技術鑑定受miR-5096調控的靶蛋白。進一步採用小鼠膠質瘤模型，結合3D透明大腦成像技術在動物體內驗證上述機理。研究力爭揭示miR-5096對膠質瘤微環境的調控機制，為控制膠質瘤侵襲提供分子靶標和理論依據。
結題摘要
膠質瘤侵襲性生長的特性及對化療藥物的耐藥性是其復發率高預後差的關鍵。microRNA是一類廣泛分布的非編碼小RNA，能通過靶向作用於mRNA, 導致翻譯抑制以及RNA 降解來調節基因表達。本項目對miRNA在膠質瘤的侵襲性及耐藥性的形成過程所發揮的作用進行探索。我們首先檢測了miR-5096對膠質瘤細胞的增殖和遷移能力的影響，結果顯示過表達miR-5096或使用miR-5096的抑制劑均不影響膠質瘤的增殖和遷移。細胞水平上檢測miR-5096激活星形膠質細胞而促膠質瘤侵襲的機制，我們在星形膠質細胞上過表達miR-5096,觀察miR-5096激活的星形膠質細胞的上清液是否促進膠質瘤的侵襲，結果顯示該上清液對膠質瘤細胞的侵襲能力並無明顯影響。由此我們證實miR-5096激活星形膠質細胞而促膠質瘤侵襲作用並不通過上清途徑，亦排除外泌體及細胞因子途徑。我們進一步對miRNA是否通過細胞縫隙連線途徑影響膠質瘤惡性表型進行探索。qPCR及Western blot 驗證miR-5096對Cx43蛋白無影響，但我們同時發現另一條miRNA, miR-23b-3p能夠明顯下調膠質瘤細胞中Cx43的表達，並且miR-23b-3p能顯著影膠質瘤細胞對化療藥物替莫唑胺（temozolomide, TMZ）的敏感性。為此我們增加了對miR-23b-3p影響膠質瘤TMZ敏感性的機制探索，細胞實驗和動物體內證實miR-23b-3p調控TMZ耐藥，其靶標蛋白為Cx43。本研究揭示了miRNA對膠質瘤侵襲及耐藥的調控機制，為控制膠質瘤惡性表型提供分子靶標和理論依據。
