《MYH基因變異介導糖尿病腎病的線粒體機制研究》是依託南京大學，由陳慧梅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MYH基因變異介導糖尿病腎病的線粒體機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳慧梅
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
糖尿病腎病-DN是糖尿病最常見的併發症，嚴重危害人類健康，探討發病機理、提高診治水平刻不容緩。研究證實，遺傳因素是DN發病的關鍵因素之一。.我們首次報導鹼基剪下修復基因MYH的T/A變異，並提示為DN候選變異。該變異位於線粒體信號肽區，影響產物進入線粒體；而MYH作為DNA氧化損傷修復的重要組分，結果引起線粒體DNA氧化損傷累積，參與糖尿病引發的腎臟損害。本課題在前期基礎上，利用MYH-/-小鼠，及分子克隆和離、在體轉染等技術，構建線粒體MYH缺失、變異和高表達、變異高表達的細胞及動物，分析線粒體MYH表達不同對高糖損傷足細胞和STZ誘導糖尿病鼠的影響。進一步評估臨床患者的氧化損傷，結合不同基因型及與對照間的比較，明確基因變異與疾病發生髮展的關係。從基礎到臨床，體內、體外相結合，探討MYH基因變異、線粒體DNA氧化損傷與DN發病的關係及機制，加深對DN的認識，有助於篩查高危人群和早期診治。
結題摘要
糖尿病腎病是糖尿病最常見的併發症，嚴重危害人類健康，探討發病機理、提高診治水平刻不容緩。研究證實，代謝和遺傳等因素與糖尿病腎病發病的密切相關。 我們首先利用中國的糖尿病腎病人群，證實了該組患者中肥胖的分布特徵，以及腎臟損傷的特徵，並指出肥胖會加重糖尿病腎病早期的腎臟損傷，而隨著糖尿病進展，體重過輕則是腎臟預後不良的指征。我們同時建立了高分辨溶解曲線高通量基因多態性的分析體系，並開展了MYH基因變異的篩查。病例對照研究顯示，MYH基因的AluYb8MUTYH變異顯著增加了2型糖尿病的發病風險。與對照組相比，突變P 等位基因在2型糖尿病人群中的比率顯著增加。c.972 GG 和 AluYb8MUTYH 顯著增加了慢性腎功能障礙的發病風險；而對於攜帶有hOGG1 c.977GG的患者而言，若同時合併有MUTYH基因的c.972 GG (OR=2.23, P=0.001) 和 AluYb8MUTYH變異則進一步增加了疾病的發病風險。進而分析證實，MYH的變異與外周血DNA氧化損傷的累積，以及機體的炎症狀態密切相關，繼而參與增加了疾病的風險。在此基礎上，我們利用db/db小鼠模型，證實游離脂肪酸結合蛋白3(FABP3)與腎臟損傷的關係，結合雷射共聚焦和免疫電鏡等手段，提出足細胞病變的途徑及與蛋白尿的關係。我們利用Apoe–/–KitW-sh/W-sh小鼠，構建腹主動脈瘤模型，研究肥大細胞以及炎症與疾病的關係。證實，肥大細胞趨化炎症細胞的作用，參與了疾病的發生、發展，而炎症的增生以及損傷細胞的凋亡參與了這一過程。最後我們利用MYH-/-小鼠，證實MYH參與了腎臟纖維化的發生髮展；而MYH缺陷對於腎間質纖維化的進展有著顯著的保護作用，纖維化明顯顯著減少。進而，我們利用體外細胞模型，證實MYH基因與線粒體功能以及功能障礙的關係。MYH基因變異增加了線粒體DNA (mtDNA)的複製，增加了JC-1的表達，降低了線粒體膜電位，使得線粒體的功能下降，提示該變異增加了線粒體的負荷，並且呈現隨年齡增加的顯著趨勢。 研究從基礎到臨床，體內、體外相結合，探討MYH 基因變異、線粒體DNA 氧化損傷與疾病發生的關係及機制，有助於篩查高危人群和早期診治。共發表相關SCI論文7篇（已標註），培養博士2名（已畢業），碩士2名（在讀中）。對這一問題的深入探討仍在繼續中。
