MYBL2單核苷酸多態性對乳腺癌細胞的增殖作用及機制研究

《MYBL2單核苷酸多態性對乳腺癌細胞的增殖作用及機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由師弘擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：MYBL2單核苷酸多態性對乳腺癌細胞的增殖作用及機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：師弘
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

轉錄因子MYBL2不僅參與細胞周期的調控，而且可通過結合下游基因啟動子區域的DNA結合位點而調控其表達，進而影響腫瘤細胞的增殖、分化。申請者在前期研究中發現，MYBL2基因啟動子區域的SNP對乳腺癌的發生、發展起著重要的調控作用。並在後續研究中進一步證實MYBL2下游基因啟動子區域的SNP也同樣影響著乳腺癌患者的預後。但這種對乳腺癌生物學特徵的影響是否源自MYBL2基因啟動子區域的突變，目前尚未明確。本研究擬在前期分子遺傳學研究的基礎上，通過構建MYBL2正義表達螢光素酶報告載體並利用Multipoints Mutagenesis 技術對前期篩選出的突變位點進行同時定點突變，驗證其對MYBL2表達的影響，進而利用siRNA干擾、Western Blot、RT-PCR、CHIP、細胞增殖實驗等方法探討MYBL2啟動子區域突變在促進乳腺癌細胞增殖的過程中對下游基因和細胞周期的調控作用機制。

結題摘要

轉錄因子MYBL2 不僅可直接參與細胞周期的調控，而且可通過結合下游基因啟動子區域的DNA 結合位點而調控下游基因的表達，進而影響腫瘤細胞的增殖、分化。申請者在前期對瑞典人群的研究中發現，MYBL2 基因啟動子區域的突變對乳腺癌的發生、發展起著重要的調控作用。並在後續研究中進一步證實MYBL2 下游基因啟動子區域的突變也同樣影響著乳腺癌患者的預後。但MYBL2 是通過哪些途徑來調控下游基因進而影響乳腺癌細胞的生物學特徵，目前尚未明確。本研究擬在前期分子遺傳學研究的基礎上，通過構建MYBL2 正義表達螢光素酶報告載體並利用Multipoints Mutagenesis 技術對前期篩選出的突變位點進行同時定點突變，驗證其對MYBL2 表達的影響，進而利用siRNA 干擾、Western Blot、細胞增殖實驗等方法探討MYBL2在促進乳腺癌增殖的過程中對下游基因和細胞周期的調控作用機制。 其後套用基因晶片技術，篩選MYBL2的下游基因，並套用western blot及動物實驗進行進一步驗證。 深入探討了MYBL2在乳腺癌增殖中的功能及作用機制，進一步完善了MYBL2在促進乳腺腫瘤細胞增殖的理論體系，為乳腺癌的診斷和治療提供理論依據。