《MSC調控ARDS炎症反應的新機制——旁分泌TGF-β誘導Treg/Th17極化平衡》是依託東南大學，由邱海波擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MSC調控ARDS炎症反應的新機制——旁分泌TGF-β誘導Treg/Th17極化平衡
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：邱海波
- 依託單位：東南大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
抑炎和促炎反應失衡所致的炎症反應失控是ARDS發生髮展的關鍵。MSC能有效控制ARDS失控的炎症反應，然而其具體作用環節和機制尚不清楚。Treg/Th17極化失衡在ARDS炎症反應失控中扮演著重要角色。MSC能調節Treg和Th17極化且能分泌二者極化的主要調節因子TGF-β。結合我們預實驗發現MSC能上調ARDS小鼠肺組織中TGF-β水平和Treg/Th17計數比，推測旁分泌TGF-β誘導Treg/Th17極化平衡可能是MSC糾正ARDS炎症反應失衡的機制。本研究擬在MSC與Naïve CD4+T間接共培養和LPS誘導ARDS小鼠模型之上，利用基因工程上調或抑制MSC對TGF-β的分泌，體外以及在體實驗證實ARDS時MSC通過旁分泌TGF-β能促進Naïve CD4+T向Treg極化而抑制其向Th17極化，誘導Treg/Th17極化平衡，從而糾正失控的炎症反應、減輕肺損傷並促進肺修復。
結題摘要
調節性T細胞（Treg）/輔助型T細胞（Th）17失衡是介導急性呼吸窘迫征（ARDS）免疫損傷的重要環節，是治療ARDS的關鍵，間充質幹細胞（MSC）可誘導CD4T細胞向Treg分化，結合我們前期發現MSC對ARDS早期炎症反應具有重要的調控作用，因而假設恢復Treg/Th17分化平衡可能是介導MSC調控ARDS失控的免疫炎症反應的重要路徑。為證實該假設並進一步探討ARDS時MSC調控Treg/Th17失衡的機制，（1）利用外周血樣本，通過臨床回顧性研究從轉錄水平證實ARDS患者存在Treg/Th17失衡；（2）通過LPS與低氧刺激，建立體外ARDS微環境模型，證實LPS或/與低氧刺激可引起Treg分化減少，Th17分化，即Treg/Th17分化失衡，同時細胞存活減少；（3）通過體外MSC與CD4+T細胞直接/間接共培養，發現MSC均可恢復ARDS微環境下Treg/Th17失衡，同時分泌抑炎型分泌因子增加，證實MSCs治療作用不依賴細胞直接接觸，給予TGF-β1中和阻斷後，MSC治療作用消失，證實旁分泌TGF-β1是MSC改善ARDS微環境下Treg/Th17失衡的重要環節；（4）建立慢病毒介導的TGF-β1高表達MSC，通過在體實驗評價該細胞對LPS誘導的ARDS小鼠肺部Treg/Th17分化、炎症反應及病理損傷的影響，發現高表達TGF-β1MSC可進一步改善Treg/Th17分化平衡，抑制IL-17A表達，促進IL-10表達，改善肺毛細血管通透性，減輕病理損傷，同時不增加肺纖維化的發生。（5）體外MSC與CD4T細胞共培養基礎上，通過生物信息學分析及miR-155表達檢測，發現MSC可抑制LPS-低氧誘導下miR-155表達升高，TGF-β1中和後其作用消失，用時利用miR-155mimic轉染上調細胞內miR-155水平後，促Treg型轉錄因子PTPN2、Foxp3基因表達降低，Treg分化減少，而Th17分化增加。綜上可以證明：（1）MSC通過旁分泌TGF-β1 改善ARDS微環境下Treg/Th17失衡；（2）高表達TGF-β1MSC通過改善Treg/Th17失衡減輕ARDS小鼠肺部炎症反應及病理損傷；（3）抑制miR-155表達，釋放對Treg型轉錄因子靶向結合是MSC旁分泌TGF-β1調控ARDS-Treg/Th17分化平衡的重要機制（之一）。
