《MRAK081523與MiR-98靶向調控ADAMTS8在甲狀腺乳頭狀癌轉移機制中的研究》是依託同濟大學，由張小平擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MRAK081523與MiR-98靶向調控ADAMTS8在甲狀腺乳頭狀癌轉移機制中的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張小平
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
甲狀腺乳頭狀癌轉移是甲狀腺癌致死的主要原因。二代測序發現ADAMTS8在肺轉移灶中表達異常，micro RNA晶片分析發現MiR-98表達增高，螢光素酶報告實驗驗證ADAMTS8是miR-98的靶基因；lnc RNA晶片發現MRAK081523在轉移灶中異常降低；通過序列比對及RNA沉默技術，確認二者是競爭性內源RNA。蛋白晶片發現肺轉移灶中Ras/MEK/ERK和PI3K-Akt/PKB 通路異常活化。經免疫共沉澱發現EGF是ADAMTS8的靶蛋白，而EGFR是其特異結合受體，Ras/MEK/ERK和PI3K-Akt/PKB通路是EGFR的下游通路。本研究擬在分子，細胞，體內以及臨床水平上驗證MRAK081523聯合miR-98作用於ADAMTS8，調控Ras/MEK/ERK和PI3K-Akt/PKB通路在PTC惡性轉移中的機制，為甲狀腺癌臨床治療惡性轉移尋找新靶點。
結題摘要
長鏈非編碼RNAs (Long noncoding RNAs, lncRNAs)是一類新型的與腫瘤發生相關的基因表達調控因子，但其在甲狀腺乳頭狀癌(PTC)中的作用尚不清楚。採用實時螢光定量PCR (qPCR)技術檢測lncRNA OIP5-AS1、miR-98和ADAMTS8在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達。免疫組化(IHC)檢測ADAMTS8的表達。利用RNA免疫沉澱(RIP)和螢光素酶報告基因分析來評估OIP5-AS1、miR-98和ADAMTS8之間的關係。利用MTT法、菌落形成法、transwell法和離體創面癒合法檢測了OIP5-AS1、miR-98和ADAMTS8在PTC細胞中的生物學功能。在體內實驗中，我們使用異種移植模型來研究OIP5-AS1和ADAMTS8對PTC的影響。在這裡，我們研究了lncRNA OIP5-AS1在PTC中的作用。功能實驗表明，過表達OIP5-AS1可促進PTC細胞的增殖、遷移侵襲和體內增殖。OIP5-AS1通過MEK/ERK和PI3k/Akt信號通路部分促進了PTC細胞的進展，而ADAMTS8在PTC中過表達。進一步，我們確定OIP5-AS1表達升高，並與PTC組織和細胞中的ADAMTS8水平相關。螢光素酶報告基因分析結果顯示，miR-98可直接作用於ADAMTS8，而機制實驗表明OIP5-AS1可作為競爭性內源性RNA (ceRNA)，並充當miR-98的海綿，可激活ADAMTS8。我們的研究結果表明，OIP5-AS1是影響PTC發展的腫瘤調節因子，對PTC的認識可以提高PTC的診斷和治療水平。
