MINK1激酶在T細胞早期發育中的功能及作用機制研究

《MINK1激酶在T細胞早期發育中的功能及作用機制研究》是依託浙江大學，由鄭明珠擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：MINK1激酶在T細胞早期發育中的功能及作用機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：鄭明珠
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

T細胞是機體抵抗外界病原感染的重要免疫細胞，其發育過程也一直是國際免疫學界所關注的熱點之一。Mink1是利用SAGE（serial analysis of gene expression）方法，在CD4+ T細胞中篩選到的高表達基因，其編碼了一個絲氨酸/蘇氨酸激酶。早期研究通過RNAi技術顯示MINK1參與了T細胞的陰性選擇過程。本課題為了進一步研究MINK1在T細胞發育分化和活化中的作用，構建了Mink1基因缺陷小鼠，對小鼠的初步表型分析顯示，MINK1缺陷小鼠T細胞早期發育階段受阻。本項目將進一步揭示MINK1在T細胞早期發育中的功能，闡明其作用的分子機制，進一步完善我們對T細胞發育相關分子事件的認識。

結題摘要

胸腺細胞的發育受到細胞選擇的嚴格調控，只有一小部分成功組裝TCR的胸腺細胞能發育成熟。 因此維持這些少數成功通過選擇的T細胞存活至關重要。然而在胸腺中確保T細胞存活的信號機制尚不完全清楚。 在本課題中，我們利用磷酸化質譜技術，描繪了陽性選擇中胸腺細胞的絲氨酸／蘇氨酸磷酸譜。結果顯示在陽性選擇中的胸腺細胞在TCR的刺激下，發生了大量的蛋白去磷酸化過程。接下來的底物分析結果提示蛋白磷酸酶2A是發育中胸腺細胞發揮去磷酸化作用的核心蛋白酶。Ppp2ca flox/flox-Lck-Cre小鼠 (PP2A cKO)使PP2A催化亞基 α在T細胞中特異性敲除，表現出雙陽性細胞凋亡相關蛋白的去磷酸化失調，進一步導致了雙陽性胸腺T細胞的數目減少。PP2A條件性敲除小鼠中DP細胞的凋亡水平增強導致了胸腺發育異常。最後，我們利用Bcl2轉基因小鼠或者p53缺陷小鼠和PP2A條件性敲除小鼠雜交，發現能很好的挽救胸腺細胞發育的缺陷。綜上所述，我們的工作揭示PP2A主要通過調節細胞的存活來促進胸腺T細胞的發育。