《Lyn激酶介導FIP1L1-PDGFRA/JAK2信號通路在CEL中的作用及機制研究》是依託中南大學，由李斌擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Lyn激酶介導FIP1L1-PDGFRA/JAK2信號通路在CEL中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李斌
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
固化激活的FIP1L1-PDGFRA酪氨酸激酶（簡稱F/P）可促嗜酸性粒細胞克隆增殖、異常活化並浸潤損害臟器，導致慢性嗜酸性粒細胞白血病（CEL）發生，嚴重威脅患者生命。前期工作發現，JAK2介導F/P激酶促細胞增殖，抑制凋亡和誘導細胞活化，同時發現Lyn激酶在F/P（+）CEL患者過度磷酸化並可伴隨JAK2阻斷而被抑制；為深入探討Lyn激酶介導F/P/JAK2信號在CEL中的作用機制，項目首先明確F/P(+)嗜酸性細胞Lyn與活化的F/P及JAK2的關係；在此基礎上，特異阻斷Lyn激酶，觀察細胞增殖凋亡及移動活性的變化，並檢測Lyn作用的下游分子；然後，建立F/(+)CEL小鼠移植模型，觀察Lyn激酶抑制後受累靶器官功能及組織病理學變化，闡明Lyn激酶介導F/P/JAK2誘導嗜酸性細胞活化浸潤損害臟器的作用機理；為研發F/P(+)CEL及其他原因不明的嗜酸性細胞浸潤相關疾病提供干預靶標。
結題摘要
高嗜酸性粒細胞綜合徵表現為原因不明持續的嗜酸性粒細胞增高，並伴有靶器官的嗜酸性粒細胞浸潤和功能受損。最近發現，FIP1L1-PDGFRA融合癌基因（F/P）是導致嗜酸性粒細胞克隆性增殖及其惡性表型的主要原因；然而，動物模型表明，單獨表達F/P癌基因並不足以誘導臨床慢性嗜酸性粒細胞白血病（CEL）表型，而必需協同細胞因子IL-5才能特異性的促使嗜酸性細胞惡性增殖和浸潤; 其機制不明；研究已經證實Lyn 是IL-5 刺激嗜酸性粒細胞生成的重要下游分子；本研究發現，F/P陽性的CEL細胞存在Lyn蛋白過度磷酸化；抑制或敲除Lyn蛋白，從而抑制F/P介導的CEL細胞增殖和凋亡阻滯。而且，我們觀察到IL-5能增強F/P活化的Lyn蛋白水平；阻抑Lyn 蛋白能顯著抑制IL-5誘導的EOL-1細胞的MBP釋放，並伴隨磷酸化的PI3K/Akt的抑制。共轉染IL-5RA及F/P至CD34+細胞導致IL-5RA及Lyn的磷酸化，IL-5因子刺激加強其磷酸化水平。同時我們還觀察到，Lyn能結合磷酸化的IL-5RA,及F/P和JAK2 蛋白；並且我們進一步鑑定F/P陽性細胞的FIP1L1-PDGFRA/JAK2/Lyn/Akt複合物。與單一抑制劑比較，雙重抑制JAK2及Lyn能破壞FIP1L1-PDGFRA/JAK2/Lyn/Akt複合物，更有效的抑制EOL-1細胞及格列衛耐藥細胞的增殖。總之，我們研究發現，Lyn介導了F/P基因驅使的CEL臨床表型，通過活化並擴增F/P陽性細胞的IL-5RA信號通路，從而促使嗜酸性粒細胞失控性增殖和過度活化，而表現為臨床上持續的高嗜酸性細胞及靶器官的損害。
