LncRNA介導腫瘤相關巨噬細胞促進乳腺癌轉移分子機制研究

《LncRNA介導腫瘤相關巨噬細胞促進乳腺癌轉移分子機制研究》是依託中山大學，由曾銀朵擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：LncRNA介導腫瘤相關巨噬細胞促進乳腺癌轉移分子機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：曾銀朵
• 依託單位：中山大學

中文摘要

腫瘤相關巨噬細胞（TAMs）在乳腺癌轉移過程中發揮重要作用。前期研究提示TAMs通過分泌CCL18影響乳腺癌的發展和轉移，干擾CCL18的表達可顯著抑制乳腺癌細胞轉移。長鏈非編碼RNA（lncRNA）與腫瘤侵襲轉移密切相關。但lncRNA在TAMs促進乳腺癌轉移過程中的作用及其分子機制尚未明確。預實驗中發現，CCL18作用後的不同乳腺癌細胞中lncRNA表達譜發生顯著變化， lncRNA TCONS_00009927在高轉移乳腺癌細胞株中高表達，抑制其表達降低乳腺癌細胞侵襲能力，但其分子機制有待闡明。我們假設TAMs調控乳腺癌轉移過程中lncRNA TCONS_00009927起著重要作用。本課題利用qRT-PCR、Western blot等進一步探討lncRNA在介導TAMs促進乳腺癌轉移過程中的地位和尋找其下游靶基因，為靶向腫瘤微環境抑制乳腺癌轉移尋找新靶點。

結題摘要

腫瘤相關巨噬細胞（TAM）是乳腺癌腫瘤微環境中數量最多的炎症免疫細胞，是連線炎症和腫瘤途徑的關鍵組成部分。LncRNA與腫瘤生長和轉移關係密切。然而，腫瘤微環境中lncRNA對腫瘤轉移的作用尚不明確。探討腫瘤微環境中lncRNA對乳腺癌轉移特性的分子調控機制，尋找靶向腫瘤微環境的新方法具有重要意義。本課題主要是通過CCL18刺激篩選出的lncRNA，通過對lncRNA的功能及作用機制的研究，闡明lncRNA在TAM促進乳腺癌轉移中的作用機制。主要內容有：1.觀察TAM分泌CCL18對人乳腺癌細胞lncRNA 01016表達的影響。2.觀察lncRNA 01016對人乳腺癌細胞增殖、凋亡、侵襲、及轉移能力的影響。3.確定lncRNA01016互作蛋白及相關信號通路。4. 乳腺癌動物模型驗證lncRNA 01016通過該結合蛋白作用促進腫瘤轉移。5.乳腺癌臨床樣本確定lncRNA01016的作為乳腺癌預後及預測轉移的臨床意義。研究發現，lncRNA01016在乳腺癌中高表達，且與淋巴結轉移有關；體外實驗顯示，利用siRNA敲降lnc01016的表達，可以抑制乳腺腫瘤細胞的增殖、促進其從S期比例細胞減少，抑制乳腺癌轉移；機制方面，通過生物信息分析發現lncRNA受雌二醇誘導，敲降lncRNA後ERa的mRNA和蛋白水平均下降，說明lncRNA可能在mRNA和蛋白水平同時調控ERa表達。此外，RNA-seq結果顯示，敲降lncRNA後有大量基因表達發生改變。聚類分析方發現，敲降lncRNA後顯著影響細胞因子相關通路以及細胞生長通路。KEGG信號分析發現，lncRNA能影響NFKB和ER信號通路的調控，進一步證實lncRNA可以減少NFκB和ER的表達，這為乳腺腫瘤轉移研究提供了理論依據。