《Lin28調節小鼠iPS細胞向誘導性PGCs分化及機制探討》是依託北京大學，由郭新擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Lin28調節小鼠iPS細胞向誘導性PGCs分化及機制探討
- 項目負責人：郭新
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Lin28是PGCs分化新調控因子，最新發現RNA結合蛋白Musashi1(Msi1)對Lin28具有協同作用。我們前期結果表明，小鼠iPS細胞IP14D-1和形成的擬胚體(iEBs)具備誘導性原始生殖細胞(induced PGCs, iPGCs)分化潛能，全反式視黃酸(atRA)可能不參與PGCs分化基因Blimp1的調控。因此本項目提出Lin28為中心，Msi1為輔助，通過抑制let-7miRNA繼而影響Blimp1調控小鼠iPS細胞向iPGCs分化。擬採用IP14D-1和形成iEBs經atRA誘導，根據報告基因和抗體採用FACS方法從iEBs中分離假定iPGCs並鑑定。免疫共沉澱和蛋白定位確定Lin28和Msi1共同參與iPGCs分化，RNAi和超表達後檢測Blimp1和let-7表達以及嵌體製備探討其分化機制。為研究生殖細胞分化、不孕不育以及生殖細胞腫瘤發病機制提供一個新思路。
結題摘要
Lin28是體細胞重編程的四個重要調控因子之一，又是原始生殖細胞PGCs分化的調控因子，同時又具有癌基因功能，是內質網相關蛋白翻譯的總抑制劑，對腫瘤發生髮展起著重要作用。幹細胞和腫瘤細胞二者之間存在相似性，因此以LIN28A、MSI1和LAMP1為切入點，進行幹細胞和腫瘤細胞的平行研究。發現小鼠iPS細胞IP14D-1向PGCs分化過程中，Lin28對Blimp1具有正向調節作用，Msi1並沒有協同Lin28對Blimp1進行調節，但卻促進Lin28對let-7g的表達抑制。即Msi1協同Lin28增強了對let-7g的抑制作用，但並沒有加強Lin28對Blimp1的正向調控作用。LIN28A對膀胱癌細胞和胚胎幹細胞的調控方面具有相似性，LIN28A和MSI1分別敲減或者聯合敲減均不影響LAMP1的mRNA水平，但對LAMP1蛋白起抑制作用，MSI1沒有協同LIN28A調控LAMP1，LAMP1對癌細胞遷移起促進作用。總之，對幹細胞和癌細胞同時開展了LIN28的相關研究，並發現二者的確存在相似性，這對深入理解幹細胞的乾性和癌細胞惡性轉化之間的聯繫，具有重要的借鑑意義，並為探討其機制提供新思路。
