L-rhamnose修飾對腫瘤相關糖抗原疫苗效應的影響

《L-rhamnose修飾對腫瘤相關糖抗原疫苗效應的影響》是依託山東大學，由顧黎擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：L-rhamnose修飾對腫瘤相關糖抗原疫苗效應的影響
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：顧黎
• 依託單位：山東大學

中文摘要

腫瘤相關糖抗原（TACAs）疫苗作為腫瘤免疫治療的新手段備受關注，已有多種TACAs疫苗進入臨床實驗。但是TACAs的免疫原性較差，加之腫瘤患者體內的免疫功能異常，有效增強抗原遞呈細胞（APCs）對TACAs疫苗的攝取和遞呈，就成為促進TACAs疫苗走向套用的關鍵舉措。研究表明使疫苗與抗體結合，以免疫複合物的形式進行免疫，可明顯促進APCs對疫苗的攝取。體外實施這一方法存在困難，而人體內大量天然的糖抗體為解決這一問題提供了可資利用的捷徑。2009年發表的糖晶片研究結果表明，人血清中存在高豐度的抗鼠李糖（anti-rhamnose）抗體。本課題計畫合成L-rhamnose(α/β)修飾的TACAs疫苗，建立小鼠模型，檢測L-rhamnose修飾對TACAs疫苗效應的影響，期望藉助人體天然anti-rhamnose抗體這一寶庫，通過抗體介導的抗原遞呈機制，有效提高TACAs疫苗的效能。

結題摘要

腫瘤相關糖抗原（TACAs）疫苗作為腫瘤免疫治療的新手段備受關注，已有多種TACAs疫苗進入臨床實驗。雖然有些TACAs疫苗已經顯示出較好的效果，但是TACAs的免疫原性較差，加之腫瘤患者體內的免疫功能異常，有效增強抗原遞呈細胞（APCs）對TACAs疫苗的攝取和遞呈，就成為促進TACAs疫苗走向套用的關鍵舉措。研究表明，使疫苗與抗體結合，以免疫複合物的形式進行免疫，可明顯促進APCs對疫苗的攝取。體外實施這一方法存在困難，人體記憶體在的大量天然鼠李糖（anti-Rhamnose）抗體為解決這一問題提供了可資利用的捷徑。由於預實驗表明，TACAs抗原的合成難度大、產量低，為了首先檢驗在Rhamnose介導下，anti-Rhamnose與腫瘤細胞的結合能力，我們首先合成並純化了Rhamnose修飾的短肽Rhamnose-RGD。檢測結果表明，在正常人血清（含anti-Rhamnose）存在的條件下，Rhamnose-RGD及RGD與腫瘤細胞的結合併未顯示明顯區別。原因可能為人血清成分複雜，存在多種干擾因素，而且所合成的線性RGD穩定性可能比較差。繼之，我們採用另一種含有Rhamnose並且來源簡單的結構---鼠李糖脂(Rhamnolipid)，將其通過一定方式與腫瘤細胞連線，體外檢測正常人血清（含anti-Rhamnose和補體）對腫瘤細胞的補體介導細胞毒（CDC）效應。結果表明，在適當的作用條件下，補體系統可以有效殺傷Rhamnolipid修飾過的腫瘤細胞。由於人血清作為anti-Rhmnose的來源，雖然容易獲得，但會因成分複雜干擾實驗結果。於是我們對人血清中anti-Rhamnose進行了純化，獲得了高滴度的特異性抗體。之後採用自行合成的Rhamnose-OVA免疫小鼠，獲得了anti-Rhamnose升高的小鼠模型。由於課題在實施過程中，發現TACAs疫苗的化學合成費時、費力，並且造價比較高，最終通過修改實驗方案，合成了L-Rhamnose修飾的小鼠黑色素瘤B16腫瘤細胞疫苗，完成了其體內抗腫瘤實驗，結果表明L-Rhamnose修飾可以有效提高腫瘤疫苗的效果。總之，本課題目前獲得的研究結果充分提示，在Rhamnose的介導下，利用人血清中的anti-Rhamnose實現對腫瘤細胞的靶向殺傷和腫瘤細胞疫苗的免疫增強具有誘人的前景。