JNK通過負性調控XBP1s抑制多發性骨髓瘤及其臟器損害

《JNK通過負性調控XBP1s抑制多發性骨髓瘤及其臟器損害》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由許國雙擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：JNK通過負性調控XBP1s抑制多發性骨髓瘤及其臟器損害
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：許國雙
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

XBP1s在多發性骨髓瘤細胞及骨髓微環境的異常高表達是促進多發性骨髓瘤生長、溶骨性破壞及相關臟器損害的重要分子機制，而JNK的活化可以顯著抑制多發性骨髓瘤細胞的生長、阻滯骨髓微環境對多發性骨髓瘤生長和破骨細胞形成的支持作用。我們的前期研究初步發現JNK可以通過加快XBP1s蛋白的降解而負性調控XBP1s的水平及生物活性，在此基礎上我們將深入研究JNK通過磷酸化調控XBP1s蛋白的分子機制，通過體內外、過表達和敲低、位點突變等方法研究JNK-XBP1s通路在調控骨髓瘤細胞生長和凋亡、調控骨髓微環境對骨髓瘤生長和溶骨性破壞方面的重要作用及分子機制。為闡明多發性骨髓瘤的詳細分子機制和未來更有效控制多發性骨髓瘤奠定堅實的基礎。

結題摘要

以往的研究結果顯示XBP1s在多發性骨髓瘤細胞的生長和存活中發揮著重要作用，而我們的研究發現骨髓間充質細胞的XBP1s上調可以顯著增強其對骨髓瘤細胞生長和存活的支持，並促進破骨細胞的生成。本課題首先發現JNK可以直接磷酸化XBP1s蛋白，從而加快XBP1s蛋白的降解速度。進一步研究發現JNK是通過直接磷酸化XBP1s，並使XBP1s與-TrCP結合增強，從而通過增強與泛素的結合而加快XBP1s蛋白的降解速度。體外磷酸化結果顯示：JNK1、JNK2和JNK3均可在288為絲氨酸磷酸化XBP1s，當288位絲氨酸（S）突變為丙氨酸（A）是，JNK就無法磷酸化XBP1s蛋白，使XBP1s降解明顯減少從而穩定XBP1s蛋白。體外功能實驗發現：JNK不僅可以在骨髓間充質細胞中使過表達的XBP1s蛋白降解加快，而且明顯減弱間充質細胞對骨髓瘤細胞生長和存活的支持，而這種減弱作用可以被JNK抑制劑SP600125阻斷；當將野生型XBP1s和S288A突變體分別過表達到骨髓間充質細胞後發現，S288A突變體過表達細胞能更進一步促進共培養的骨髓瘤細胞的生長和存活；SP600125能進一步增強野生型XBP1s過表達的骨髓間充質細胞對骨髓瘤細胞生長和存活的支持，而對S288A突變體過表達細胞則無明顯作用。體內實驗結果初步顯示：當將野生型XBP1s過表達的骨髓間充質細胞，以及S288A突變體過表達的骨髓間充質細胞分別與骨髓瘤細胞MM.1S按一定比例混合後注射聯合免疫缺陷鼠脛骨後發現，S288A突變體比野生型XBP1s能更進一步促進溶骨性破壞，但本研究尚需進一步重複驗證。綜上所述，本課題發現JNK可以通過磷酸化XBP1s蛋白而加快其降解，從而抑制多發性骨髓瘤細胞的生長與存活，這一結果為治療多發性骨髓瘤提供了潛在的新的治療途徑。不足之處：由於骨髓瘤細胞系在用慢病毒過表達野生型XBP1s和S288A突變體時均不能存活，多次嘗試失敗，所以這部分實驗主要是在骨髓間充質細胞中過表達實現的，但對本課題的主要思路和整體結果沒有造成明顯缺陷性影響。