IKKbeta-p63途徑失調在宮頸癌發生、發展中機制的研究

《IKKbeta-p63途徑失調在宮頸癌發生、發展中機制的研究》是依託中南大學，由張瑜擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：IKKbeta-p63途徑失調在宮頸癌發生、發展中機制的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：張瑜
• 依託單位：中南大學

項目摘要

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一。人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染是導致宮頸癌發生的病因。目前已知HPV致癌的主要分子機制是通過抑制p53和pRb，但p53的同類蛋白p63的作用尚不清楚。p63蛋白在宮頸癌中表達顯著升高。但同時存在TAp63和ΔNp63兩種功能迥異的亞型，其中TAp63經轉基因動物實驗證實具有獨立於p53之外的抑癌功能，ΔNp63則抑制p53和TAp63活性，促進癌變。本項目組前期研究發現IKKβ 主要使TAp63而非ΔNp63磷酸化，並抑制TAp63轉錄活性。現擬選擇性敲除HPV16陽性宮頸癌細胞株SiHa的E6/E7，研究敲除前後IKKβ、TAp63和ΔNp63表達及活性差異，揭示IKKβ-p63途徑在HPV致癌過程中的作用；尋找和鑑定TAp63被IKKβ磷酸化的特異性位點，驗證宮頸癌組織中TAp63是否被磷酸化，為探索宮頸癌發病的機制，尋找新的治療靶點提供新線索。

結題摘要

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，而人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染是導致宮頸癌發生的病因。目前已知HPV 致癌的主要分子機制是通過抑制p53 和pRb，p63 的作用尚不清楚，現就IKKβ、p63在宮頸癌發生、發展中的分子機制的研究做了如下研究：P63、ΔNp63蛋白在宮頸鱗癌及癌旁正常宮頸組織中的表達均與IKKβ表達呈正相關，提示P63和IKKβ在宮頸癌的發生中可能具有協同作用。而IKKβ在不同分期的宮頸病變組織中具有顯著性的差異表達，提示其可能在宮頸癌變的啟動中有一定作用。HPV16陽性的宮頸癌細胞在E6基因沉默後,細胞內ΔNp63a的表達水平下降,TAp63a的表達水平隨之升高,提示ΔNp63a在宮頸癌細胞內可能起著癌基因的作用,促進細胞增殖。TAp63a在宮頸癌細胞內可能起著類似於p53的作用,調控細胞周期,促使細胞凋亡，ΔNp63a和TAp63a在宮頸癌細胞內的功能是相互拮抗的,兩者在細胞內的功能失衡可能是導致宮頸癌發生的重要機制。脂多糖能夠調節子宮頸癌細胞中IKKβ蛋白表達水平，但與HPV的感染狀態相關，而IKKβ抑制劑能夠逆轉脂多糖的這種影響。繼而，通過生物信息學預測磷酸化位點及質譜分析，分析鑑定得到IKKβ磷酸化位點為TAp63γ的S-4及S-12兩個位點，但IKKβ不能抑制S4A/S12A雙位點突變的TAp63γ轉錄活性，而是通過對TAp63γ特異位點磷酸化，干擾其與p300蛋白的結合，從而抑制其轉錄活性。研究顯示，IKKβ-p63 途徑參與HPV的致癌過程，這也為探索宮頸癌發病的機制，尋找新的治療靶點提供了新線索。