《IFITM3調節結腸癌免疫逃逸的作用機制研究》是依託上海交通大學，由崔菲菲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：IFITM3調節結腸癌免疫逃逸的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：崔菲菲
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤細胞通過誘導免疫耐受逃避機體免疫監視,調節性T細胞（Treg）是介導免疫耐受的重要細胞類型。課題組前期發現干擾素跨膜蛋白IFITM3是新的結腸癌腫瘤標誌物,高表達IFITM3的結腸癌細胞促進Treg體外趨化和體內浸潤；體外IFITM3通過NF-kb通路特異性上調結腸癌細胞表達CXCL14，促進Treg遷移。由此推測IFITM3通過誘導結腸癌細胞分泌CXCL14，趨化Treg浸潤以抑制CD8+殺傷T細胞功能，介導結腸癌細胞免疫逃逸。本項目擬利用人結腸癌組織晶片和小鼠結腸癌模型闡明IFITM3表達與Treg和CD8+CTL浸潤相關性；利用體內外抗體中和揭示IFITM3通過上調CXCL14表達促進Treg浸潤的機制；利用點突變、染色質免疫沉澱等明確IFITM3通過調控NF-kb信號通路上調CXCL14表達的分子機制。旨在闡明IFITM3介導結腸癌免疫耐受的作用機制，為臨床免疫治療提供新靶點。
結題摘要
結直腸癌是全球第三大高發腫瘤，致死率高居第四位。除錯配修復基因以外，目前仍無有效的診斷性腫瘤標誌物，主要原因還是由於人們對腫瘤發生髮展機制缺乏透徹認識。本課題通過探索腫瘤微環境中腫瘤細胞與調節性T細胞的相互作用，在體外transwell實驗揭示結腸癌特異性腫瘤標誌物IFITM3介導腫瘤細胞促進調節性T細胞遷移；體內成瘤實驗揭示腫瘤細胞高表達IFITM3與腫瘤組織中調節性T細胞浸潤正相關，與CD8+殺傷T細胞浸潤負相關。在體外高表達IFITM3能夠顯著上調CXCL14蛋白表達水平，進而促進調節性T細胞向腫瘤細胞的遷移；在體外中和CXCL14能夠顯著抑制過表達IFITM3結腸癌細胞系對調節性T細胞的招募能力。然而，在體內條件下，利用特異性抗體清除調節性T細胞並不能顯著阻斷IFITM3對腫瘤發生的促進作用；中和CXCL14未對IFITM3高表達細胞系形成的腫瘤組織中調節性T細胞浸潤造成影響。因此，我們認為IFITM3能夠在體外介導調節性T細胞遷移，但是在體內複雜病理環境中，IFITM3對腫瘤發生的促進作用並非主要依賴於對調節性T細胞的浸潤的調控，而是依賴於IFITM3對腫瘤細胞自身的調控。儘管如此，對於腫瘤細胞和免疫細胞相互作用機制的研究仍然對於我們深入了解腫瘤免疫逃逸機制和找到潛在的治療靶點具有重要的意義。另外，由於前期研究結果發現IFITM3可以通過NF-kb信號通路上調CXCL14，且NF-kb典型通路的激活對於結腸癌二期患者具有重要臨床診斷意義，因此我們通過對NF-kb上游調控分子的探索，找到了更為關鍵的調控NF-kb信號通路的新型腫瘤標誌物DDA1。我們發現DDA1在腫瘤組織中mRNA和蛋白水平顯著高於周圍正常組織；沉默DDA1或者過表達DDA1能夠顯著抑制或促進小鼠體內腫瘤組織的形成。過表達或沉默DDA1結直腸癌細胞系HT29和SW580中NF-kb的核定位相應增加或減少。免疫印跡檢測p-Ikb、p-IKK、CSN2和p-GSK3b等NF-kb信號通路組分在過表達DDA1細胞中顯著增加，證明結直腸癌腫瘤中DDA1激活NF-kb/CNS2/GSK3b的信號通路促進結直腸腫瘤發生髮展。這部分研究內容已作為研究論文的一部分數據已在國際腫瘤期刊《oncotarget》上發表（影響因子：5.0,2016,12;7(15):19794-812）。
