IDH1 R132H突變體通過下調p53促進膠質瘤發生的機理

《IDH1 R132H突變體通過下調p53促進膠質瘤發生的機理》是依託廈門大學，由李勤喜擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：IDH1 R132H突變體通過下調p53促進膠質瘤發生的機理
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李勤喜
• 依託單位：廈門大學

項目摘要

近幾年在高達75%的Ⅱ、Ⅲ級膠質瘤中發現異檸檬酸脫氫酶1（IDH1）發生了R132H突變。而該突變體導致膠質瘤發生的機理還不甚清楚。因為沒有動物模型，目前的研究主要限於體外培養的細胞，嚴重製約了研究進展。為此，我們構建了IDH1 R132H突變體的條件性基因敲入小鼠，並用此小鼠對該突變體導致腫瘤發生的機理進行了初步研究。通過Western blot、形態學及繪製細胞生長曲線，我們發現該突變體能強烈下調抑癌因子p53的蛋白水平並促進細胞增殖；臨床膠質瘤標本的檢測結果也表明該突變體能下調p53。說明下調p53可能是其引起膠質瘤發生的主要原因之一。本項目擬首先研究該突變體下調p53的分子機制；進而研究其對細胞周期、細胞衰老及細胞增殖的影響；最後通過在小鼠腦組織表達該突變體建立小鼠膠質瘤模型，並結合對臨床膠質瘤標本的研究揭示該突變體通過下調p53導致膠質瘤發生的機理，為膠質瘤的治療提供新的思路。

結題摘要

異檸檬酸脫氫酶1（IDH1）R132H突變在多種腫瘤中被發現而受到廣泛的關注，其致癌機理還有待闡明。p53是目前人類發現的最重要的抑癌基因之一，p53的失活與多種腫瘤的發生密切相關。然而IDH1 R132H突變體是否對p53有直接的調節作用目前仍不清楚。本研究的前期工作中發現該突變體能強烈下調抑癌因子p53的蛋白水平並促進細胞增殖，說明下調p53可能是其引起膠質瘤發生的主要原因之一。本項目首先研究了該突變體下調p53的分子機制；進而研究了該突變體下調p53在腫瘤發生中的作用；最後結合臨床膠質瘤標本對機理進行了驗證。需要注意的是我們盡了最大努力去構建突變體條件性敲入的膠質瘤模型，但我們沒有得到模型小鼠，因為突變體會引起腦出血導致胚胎致死。 總之，在本項目的研究中，我們先構建了肝臟特異性IDH1 R132H突變體的基因敲入小鼠，並分離了胚胎成纖維細胞。通過Western blot、Real-time PCR和螢光素酶報告實驗，我們發現IDH1 R132H突變體通過產生2-HG抑制了HIF-2α的羥基化及其泛素化降解導致HIF-2α升高，累積的HIF-2α促進了miRNA-380-5p的轉錄。miR-380-5p直接作用於p53 mRNA的3’-UTR，使其降解。最後，進一步用實驗證明IDH1 R132H突變體下調p53顯著促進了細胞增殖和抵抗由DNA損傷誘導的細胞凋亡，促進了膠質瘤的發生。本項目的研究揭示了IDH1R132H突變體下調p53促進膠質瘤發生的分子機理，加深了目前對膠質瘤發生的理解，為膠質瘤的治療提供新的思路。