《HnRNP L調節DNA損傷修復介導結直腸癌化療耐藥的機制研究》是依託四川大學，由胡文君擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HnRNP L調節DNA損傷修復介導結直腸癌化療耐藥的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：胡文君
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
化療是結直腸癌(CRC)的主要治療方式之一。而化療耐藥是導致療效不佳、患者腫瘤復發的主要原因。我們前期發現hnRNP L可與DNA結合併調節DNA修復（Hu, 2015. PNAS）；沉默hnRNP L可提高CRC細胞對5-氟尿嘧啶（5-FU）以及奧沙利鉑（Oxaliplatin）的敏感性。由此，我們提出hnRNP L介導化療耐藥的新機制，即hnRNP L通過促進DNA修復，去除5-FU代謝產物及Oxaliplatin對DNA的損傷，避免自身凋亡。本項目擬進一步採用免疫共沉澱、蛋白質譜分析以及siRNA等手段揭示hnRNP L在5-FU及Oxaliplatin耐藥中的作用，並觀察hnRNP L缺失對腫瘤耐藥細胞的生物學行為影響，旨在探索hnRNP L調控下DNA修復介導耐藥的機制，以及干預hnRNP L作為治療CRC耐藥的可行性等關鍵科學問題。為降低化療抵抗，制定合理的治療方案提供新思路。
結題摘要
結直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是最常見的人類腫瘤之一，其發病率和死亡率在腫瘤疾病中分別位於第三位和第四位。目前，化療仍然是我國CRC綜合治療的重要組成部分，而化療耐藥是腫瘤復發及轉移進而導致死亡的重要原因之一。因此，深入研究CRC化學藥物(奧沙利鉑)耐藥的機制，尋找抑制腫瘤化療耐藥的手段，對提高CRC綜合治療效果，提高患者生存率具有十分重要的意義。本研究藉助於B細胞系中抗體種類轉換模型（CSR）細胞系CH12F3-2A，篩選出一系列對DNA修復可能產生影響的修復因子；並在結直腸癌細胞系中深入研究了這些蛋白在該過程中的作用，如拓撲異構酶I (Top1)、BRD4以及hnRNP L等。發現了不同臨床分期的結直腸癌細胞中，部分DNA修復蛋白的表達水平及其對化療藥物的敏感性差異。其中，我們詳細論述了1、聯合Top1及相關功能蛋白BRD4的抑制劑對DNA修復影響以及在結直腸癌治療中的機制；2、也論證分析了hnRNP L通過調節DNA修復因子53BP1以及BRCA1在DNA雙鏈斷裂處的磷酸化水平來影響DNA修復的選擇，並闡明了降低hnRNP L後，結直腸癌細胞化療敏感性的變化。同時，為了更好的分析DNA修復因子之間的相互作用，本人聯合納米實驗室開展了基於表面等離激元（SPR）原理的蛋白結合分析方法研究，嘗試精確定量分析DNA修復因子之間的結合關係。綜上所述，本研究從多方面闡述了DNA修復因子影響結直腸癌細胞化療敏感性的機制，為今後制定更為有效的治療方案提供新思路。
