Hi-C

Hi-C

Hi-C技術——以高通量測序為手段,以3C技術為基礎的染色質構象捕捉技術。

Hi-C(High-throughput/resolution chromosome conformation capture)主要步驟是先製備適合Hi-C的3C模板,限制酶切割後末端連線生物素標記的核苷酸。鈍端連線之後DNA純化剪下。生物素pull-down保證只有連線的部分用於分析。讀長reads被定位到基因組上,當這一對讀長發現在不同片段上的時候,對互作片段進行相應評分。這樣,一個包含基因組所有片段的連線頻率矩陣被構建。Lieberman-Aiden等發現,哺乳動物HiC試驗的解析度為~1Mb(~10 RMPD,million paired-end reads)。通過4C確定試驗在Hi-C可以得到驗證。Hi-C試驗讓科學家們發現,核記憶體在特定的染色質區隔(Chromatin Compartment),染色質和異染色質在不同的區域(Open區和Close區)。Cell等發現,人類不同類型細胞系,細胞核染色質組織大致相同。總之,Hi-C方法是全基因組範圍內,不限制特定互作蛋白為局限,利用高通量測序(二代或三代)的基於“全對全”模式的染色質互作構象分析方法。在人類,小鼠上目前都有相關發現發表。

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