HCMV UL138在人巨細胞病毒潛伏感染中的作用及調控機制研究

《HCMV UL138在人巨細胞病毒潛伏感染中的作用及調控機制研究》是依託浙江大學，由錢春艷擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：HCMV UL138在人巨細胞病毒潛伏感染中的作用及調控機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：錢春艷
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

人巨細胞病毒（HCMV）具有“潛伏－再激活”的感染生物學特性，探明病毒潛伏狀態維持及再激活機制對建立有效的HCMV感染控制手段具有重要意義。HCMV潛伏感染形成與維持的分子機制尚未闡明，我們前期研究發現，HCMV UL138基因高表達與HCMV潛伏感染密切相關，而HCMV潛伏感染細胞自噬水平升高，強力提示UL138可能參與了HCMV潛伏感染細胞的自噬調控過程，可能與HCMV潛伏感染的形成有關。本課題擬在此基礎上研究UL138表達與HCMV潛伏感染細胞的自噬特徵關係，通過siRNA干擾HCMV潛伏感染細胞中UL138的表達及在THP-1細胞中過表達，觀察UL138表達水平的變化對細胞自噬的影響。通過RNA-Seq分析尋找UL138調節細胞自噬的潛在結合靶分子並進行驗證，從而闡明UL138 在HCMV潛伏感染中可能的作用靶點和分子機制。本課題為建立有效的臨床防治潛伏病毒再激活提供新的思路。

結題摘要

人巨細胞病毒 (HCMV) 具有“潛伏-再激活”感染的生物學特性，探明病毒潛伏狀態維持及再激活機制對建立有效的HCMV感染控制手段具有重要意義。HCMV潛伏感染形成與維持的分子機制尚未闡明。在本研究中，首先，我們通過生物信息學方法分析了HCMV UL138基因，利用ProtParam 線上程式分析UL138 蛋白的一級、二級和三級結構。分析發現：UL138蛋白由169個胺基酸組成，屬於不穩定且親水蛋白。預測該蛋白含有11個潛在的絲氨酸磷酸化位點。該蛋白含有一個跨膜區，部分胺基酸序列與TLR4結構類似。熱點突變位點包括第112位、第124位和第131位。而第112位、第131位和第153位具有較高的胺基酸多態性。其次，在本課題組前期研究基礎上，我們發現在普通人群HCMV病毒潛伏感染時，UL138基因高表達，細胞自噬水平升高 (Beclin-1升高，LC3I/II升高)。模擬宿主細胞THP-1中過表達UL138基因時，細胞自噬水平升高。表明該基因的表達對宿主細胞自噬水平有一定的正相調節作用。該基因對宿主細胞自噬信號通路的作用機制部分還需要進一步研究。另外，我們發現該蛋白表達不穩定，主要通過泛素化途徑降解，與生物信息學預測分析結果一致。通過本研究，為今後臨床防治潛伏病毒再激活提供一定的理論依據和實驗基礎。