《HBx蛋白逃避E3泛素連線酶Siah-1降解的分子機制研究》是依託復旦大學，由趙晶擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HBx蛋白逃避E3泛素連線酶Siah-1降解的分子機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙晶
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
B肝病毒（HBV）編碼的HBx是多功能原癌蛋白，其表達水平與肝癌發展密切相關。泛素-蛋白酶體途徑是細胞降解HBx蛋白的重要方式。我們前期研究發現， E3泛素連線酶Siah-1能介導HBx的泛素化並使其通過蛋白酶體途徑降解，從而抑制HBx的轉錄激活作用。但Siah-1不能降解肝癌中有致癌作用的HBx缺失截短體，並且DNA損傷和炎症調節因子TNF-α刺激都能抑制Siah-1介導的HBx降解。因此我們推測，在肝癌發展進程中，HBx能夠逃避Siah-1的降解，增強其致癌潛能。本課題將研究HBx缺失截短體、DNA損傷和TNF-α刺激對Siah-1與HBx互作及共定位的影響，探討相關激酶ATM/ATR及IKK對Siah-1的磷酸化修飾作用，檢測磷酸化的Siah-1對降解HBx的影響，從而闡明HBx逃避Siah-1降解的分子機制，以期更全面了解HBx與肝癌發生髮展的機制，為開發新型肝癌防治策略奠定基礎。
結題摘要
在國家自然科學基金（NSFC 81201521）的支助下，本課題組對HBx蛋白逃避E3泛素連線酶Siah-1降解的分子機制開展了深入研究。我們收集並提取了270例肝癌組織及9株肝癌細胞系的DNA，對Siah-1基因進行了突變篩查，儘管沒有檢測到Siah-1突變，但發現Siah-1在肝癌組織中表達減少。同時，在這批標本中還發現了大量的HBx缺失截短突變，其中包括很多已被證實具有強致癌潛能的HBx突變體。隨後我們構建了3個在肝癌組織中檢測到的、具有致癌作用的HBx突變體，發現它們能激活熱休克反應元件（HSE），而HSE通路的激活可以促進細胞的惡性增殖。研究還發現，Siah-1僅能降解全長的HBx蛋白，並抑制HBx的轉錄激活作用，但Siah-1不調控HBx突變體的蛋白水平，也不改變它們的轉錄活性。深入研究表明，Siah-1與HBx截短體的結合能力明顯減弱，導致其不能發揮降解作用。上述研究不僅闡明了HBx逃避Siah-1降解的分子機制，也為研究HBx的促癌作用提供了新線索。此外，本項目還發現HBx的高表達能抑制miR-375和miR-136的水平，進而提高這兩個miRNA的共同靶點AEG-1蛋白的表達，促進肝癌細胞的遷移。這進一步豐富了對HBx促癌機制的認識。本課題組還研究了長鏈非編碼RNA（lncRNA）在胃癌中的調控機制。在胃癌組織中進行了lncRNA晶片篩查，發現了大量與淋巴轉移及分化差等相關的lncRNAs，並對Linc00152 和lncRNA GAS5的功能進行了深入研究。發現Linc00152能調控細胞增殖、表皮間充質轉換以及胃癌細胞的侵襲和轉移，這提示Linc00152可能是一個新的胃癌診療靶點。對GAS5的研究發現，它能與轉錄因子YBX1結合併調控YBX1蛋白的穩定性，以此影響p21的表達，進而調控細胞周期進程，闡明了胃癌中GAS5全新的抑癌機制。最近我們對lncRNA在胃癌中的各種作用機制進行了全面歸納總結，並展望了lnRNA作為分子標記物及治療靶點的臨床轉化潛能。綜上所述，我們對肝癌和胃癌這兩大消化系統腫瘤的深入研究，將為開發新型的腫瘤防治策略提供重要的理論依據，也將為精準醫療計畫的實施提供新思路。
