《Graves病新生耐受模型的最佳化及機制研究》是依託西安交通大學，由伍麗萍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Graves病新生耐受模型的最佳化及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：伍麗萍
- 依託單位：西安交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本項目是在前期成功誘導新生小鼠免疫耐受預防Graves病基礎上，以耐受劑量和方式為參考，將表達TSHR A亞單位的重組腺病毒分別設3種不同劑量肌肉注射新生雌性BALB/c小鼠，成年後誘導Graves病發生，觀察耐受誘導效果，分析Aire基因在不同免疫器官和組織的表達情況、Th亞群比例及Treg細胞數目、功能變化、Th1/Th2/Th17/Treg平衡轉換，探索誘導新生耐受預防Graves病的最佳方式及可能機制。以Aire基因敲除小鼠為工具，選擇最佳劑量誘導新生耐受，觀察Aire缺失對新生耐受誘導的影響，研究不同時期不同免疫器官、組織Aire基因表達和相應免疫反應變化的關聯，進一步探索Aire基因在調節新生耐受預防Graves病中的作用。本課題是在前期研究工作基礎上的進一步拓展和深化，並將會輻射至整個自身免疫性疾病的預防和治療，其研究成果具有重要的理論價值和廣闊的套用前景。
結題摘要
Graves病為一種常見的具有遺傳傾向的自身免疫性疾病，該病主要由於機體免疫系統對自身成分促甲狀腺素受體（thyroid stimulating hormone receptor, TSHR）發生免疫應答產生其抗體所致。目前尚無針對病因治療的方法。誘導新生耐受有可能成為預防Graves病的一條有效途徑，而Aire在成年耐受中起著一定作用。因此，本項目在前期成功誘導新生小鼠免疫耐受預防Graves病基礎上，構建、擴增、純化表達TSHR A亞單位的重組腺病毒（Ad-TSHR289），再以不同劑量Ad-TSHR289預處理0-3天的雌性BALB/c小鼠，成年後誘導Graves病發生，觀察耐受誘導效果，結果再次證明注射劑量及誘導時間在新生耐受建立過程中起著重要作用。為了進一步探索新生耐受的機制，首先開始繁殖Aire基因敲除小鼠，分別獲取Aire+/+、Aire+/-、Aire-/-新生小鼠，選擇最佳劑量預處理不同組的新生小鼠，觀察成年後耐受對Graves病誘導的預防作用，結果顯示Ad-TSHR289及對照病毒預處理的Aire-/-新生小鼠、TRAb、TT4的平均水平均明顯升高，兩組之間相比較無明顯差異，Ad-TSHR289預處理的Aire+/+新生小鼠和Aire-/- 、Aire+/-相比較TRAb、TT4平均水平明顯降低，Aire-/-比 對照病毒預處理的Aire+/+小鼠TSHR抗體及甲狀腺素水平更高些，但差異無統計學意義。所有發生甲亢的小鼠均出現了甲狀腺組織的增生。小鼠脾臟Th1/Th2/Th17/Treg相關細胞因子流式檢測顯示Aire+/+耐受小鼠CD4+Foxp3+/CD4+、IL-4+/CD4+細胞比例水平較其它組明顯增高，但各組間IFN-γ/CD4+、IL-17A+/CD4+比例無顯著性差異。此外，在Th17/Treg相關基因表達水平的測定中，Aire+/+耐受小鼠脾細胞的Foxp3mRNA明顯高於其它組，而TGFβ、RORγmRNA和其它組之間差異無統計學意義。由此提示：AIRE基因在新生耐受誘導過程中起著重要作用，而耐受小鼠機體免疫反應以Treg和Th2上調為主。該研究探索了誘導新生耐受預防Graves病的最佳方式及可能機制。以及Aire基因在新生耐受中的作用。本課題是在前期研究工作基礎上的進一步拓展和深化，其研究成果將來有可能套用於人類Graves病的
