《Gpr48在皮膚鱗狀細胞癌發生中的功能及機制》是依託華東師範大學，由葉希韻擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Gpr48在皮膚鱗狀細胞癌發生中的功能及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：葉希韻
- 依託單位：華東師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
G蛋白偶聯受體48(Gpr48/Lgr4)是一種孤兒受體，在男性生殖道、眼瞼、頭髮和骨骼的發育中起重要作用，與腫癌的發生也密切相關，但Gpr48作用的分子機腳嫌詢制還不十分清楚。我們的前期實驗結果發現，Gpr48基因敲除小鼠能顯著降低DMBA/TPA誘導皮膚鱗狀細胞癌（SCC）的發生率，其小鼠表皮基底層細胞的分裂增殖水平也明顯降低。初步的分子機制揭示，Gpr48缺失會導致表皮PKC、ERK、GSK3β蛋白磷酸化水平的降低。本課題將利用小鼠皮膚SCC模型和Gpr48基因敲除細胞模型，從整體、細胞和分子等旬廈和方面深入探索Gpr48在皮膚SCC發生中的功能及調控機制。我們將通過研究Gpr48對PKC-ERK、Wnt信號通路以及它們在表皮幹細胞和SCC幹細胞中功能的影響，揭示並尋找Gpr48在皮膚SCC發生中的關鍵信號通路和重要效應分子，為今後通過抑制Gpr48活性來治療SCC提供理論和實驗依據。
結題摘要
G蛋白偶聯受體48 (Gpr48)又名G蛋白偶聯受體Lgr4（Leucine-rich repeat containing G-protein coupled receptor 4）在男性生殖道、眼瞼、頭髮和骨骼的發育中起重要作用，它與腫瘤的生長和轉移也密切相關。Lgr4在皮膚組織中有高表達，並影響著皮膚的發育過程，但Lgr4在皮膚癌的發生髮展中是否起著重要的作用，還未見任何報導。我們通過研究發現Lgr4缺失能夠明顯抑制由DMBA/TPA誘導探訂境承小鼠皮膚癌的發生。我們的研究還發現埋習鴉在野生型小鼠中TPA能夠明顯地激活MEK1/2，ERK1/2，β-catenin的表達，但當Lgr4缺失後，這些蛋白的激活受到明顯地抑制。我們通過抑制劑的實驗證明了當MEK1/2-ERK1/2激活受到抑制後，β-catenin的入核現象也受到了明顯抑制，這就提示我們，ERK1/2的激活可能激活了β-catenin的入核，從而激活了下游的靶基因例如cyclinD1的活性。我們的研究證明了Lgr4可以通過PKC/ERK和Wnt/β-catenin兩條信號通路來調控皮膚癌的發生和生長，那么這兩條信號通路是否存在Crosstalk的現象呢，肯奔於是我們利用抑制劑實驗，將U0126與FH535加入鱗癌細胞A431和小鼠原代培養的角質形成細胞中檢測這兩種信號通路相關蛋白的表達，利用紙拒判墊shRNA干擾實驗成功敲低了ERK1/2的表達，結果發現ERK1/2受到抑制或表達下調，能夠引起β-catenin表達的降低和下調,這足以證明ERK1/2能夠直接調控β-catenin的表達，從而促進皮膚癌的產生。而P-ERK1/2的激活一方面可以激活p-gsk3β，使蛋白質降解複合體解體，從而促進β-catenin的穩定性，入核增加使得下游的c-myc，cyclinD1等癌提騙己基因表達。另一方面，p-ERK1/2可以激活下游AP-1的入核促進下游靶基因的表達，從而調控細胞的增殖。因此當Lgr4敲除後，它能夠降低PKC的活性，從而阻斷了下游ERK1/2和Wnt信號通路的激活，因此抑制了小鼠皮膚鱗狀細胞癌的產生，這些研究為進一步探討Lgr4可能成為治療皮膚鱗狀細胞癌的新靶點提供了理論和實驗依據。
