《GnRH介導MLT納米微粒靶向治療前列腺癌》是依託華中科技大學，由楊為民擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：GnRH介導MLT納米微粒靶向治療前列腺癌
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊為民
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
前列腺癌的治療現狀仍不令人滿意,尤其是當癌細胞轉化成去勢抵抗性時,雄激素全阻斷治療的療效甚微。國內外的實驗研究已表明蜂毒蛋白（MLT）對前列腺癌細胞有殺傷、抑制和細胞毒作用。本課題擬將MLT經磷脂納米載體包裹製成MLT納米微粒，然後用化學耦聯的方法將促性腺激素釋放激素（GnRH）結合到該納米微粒表面，使其具有GnRH介導的高度靶向性。因前列腺癌細胞無論雄激素依賴性或去勢抵抗性，均高表達GnRH受體，GnRH介導的MLT納米微粒能特異性地和前列腺癌細胞結合，通過蜂毒蛋白四聚體洞穿細胞膜而造成癌細胞的崩解。此外，納米技術的套用使得該納米微粒更易通過血腦屏障和血睪屏障，破壞腦垂體及睪丸中高表達GnRH受體的細胞，提高其與GnRH受體的結合率，形成永久性的藥物去勢，有望為前列腺癌，特別是晚期前列腺癌、去勢抵抗性前列腺癌探索出一種新的治療方法。
結題摘要
本項目以二硬脂醯磷脂醯膽鹼(DSPC)、膽固醇（70:30）、二硬脂醯磷脂醯乙醇胺－聚乙二醇2000吡啶二硫代丙醯胺（DSPE-PEG(2000)PDP）、二硬脂醯磷脂醯乙醇胺－聚乙二醇2000胺（DSPE-PEG(2000)Amine）為膜材，採用薄膜分散法成功製備蜂毒素長循環脂質體。合成的蜂毒素長循環脂質體直徑約170nm。通過溶血實驗證實，蜂毒長循環脂質體溶血性較蜂毒素顯著降低，達到了課題設計的目的。MTT實驗，平板克隆實驗，Transwell實驗的結果表明，蜂毒素長循環脂質體對PC3前列腺癌細胞有顯著的的細胞毒性，增殖抑制以及侵襲抑制作用，而且效果與單獨套用蜂毒素相當。流式細胞儀檢測以及TUNEL實驗結果表明，蜂毒素長循環脂質體能顯著增加PC3前列腺癌細胞的凋亡。蛋白印跡試驗結果也表明，經蜂毒素長循環脂質體處理後的PC3前列腺癌細胞內凋亡相關蛋白表達顯著增加。Akt和mTOR蛋白可定位於細胞線粒體膜，其下游通道蛋白是調節細胞生物學活動重要的信號通路。對比未經處理的PC3細胞和經蜂毒素長循環脂質體及單獨蜂毒素處理的PC3細胞信號通路蛋白的表達水平發現，蜂毒素長循環脂質體能顯著抑制PI3k/Akt/mTOR通路相關蛋白的磷酸化，進而抑制PC3前列腺癌細胞增殖，促進其凋亡，而且效果與單獨套用蜂毒素相當。上述結果表明，合成的蜂毒素長循環脂質體最大程度上保留了蜂毒素的抗腫瘤活性。隨後的動物實驗進一步證明了蜂毒素長循環脂質體可靠的體內抑瘤活性。ELLISA法對不同組別裸鼠重要臟器蜂毒素濃度進行檢測，可以發現，相較於直接注射蜂毒素，套用蜂毒素長循環脂質體能顯著增加裸鼠體內移植瘤的蜂毒素濃度，並減緩其代謝速度，使腫瘤局部持續處於較高濃度的蜂毒素環境中，以達到更好的抑瘤效果。這很好地證實了蜂毒素長循環脂質體良好的靶向性。本項目結果表明，GnRH修飾的蜂毒素長循環脂質體在促進藥物蓄積、抑制腫瘤生長等方面優於游離蜂毒素製劑，而且能夠有效降低蜂毒素的溶血性。因此，本研究為設計用於腫瘤治療的納米藥物遞送系統提供了一些啟示。
