《Girdin蛋白下調經Akt-GSK3β途徑損傷線粒體致足細胞凋亡》是依託北京大學，由任雅麗擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Girdin蛋白下調經Akt-GSK3β途徑損傷線粒體致足細胞凋亡
- 項目負責人：任雅麗
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
足細胞損傷是慢性腎臟病的共同特徵及病程進展的中心始動因素，細胞凋亡是其重要途徑,線粒體損傷則是導致足細胞凋亡的主要因素之一，但目前對線粒體損傷的分子機制所知有限。已知足細胞中過表達細胞骨架相關蛋白Girdin會引起Akt活性升高，保護細胞免於凋亡，Girdin下降則效應相反；對肝癌細胞系的研究發現，過表達Girdin在活化Akt的基礎上致其下游GSK3β活性下降。由於申請人前期發現阿黴素大鼠足細胞Girdin表達下降，同時在腫瘤細胞中發現Girdin下降可致線粒體損傷，因此我們認為Girdin下降通過Akt/GSK3β途徑引起線粒體損傷致足細胞凋亡。本研究將通過培養的足細胞和動物模型分析Girdin表達情況、足細胞線粒體形態和功能變化及足細胞凋亡間的關係，進而改變足細胞Girdin水平來驗證其通過Akt/GSK3β途徑損傷線粒體的機制。本研究結果能為深入了解足細胞損傷的分子機制提供證據。
結題摘要
慢性腎臟病是中國發病率高、嚴重威脅患者生活質量和身體健康的一大類疾病。足細胞損傷是慢性腎臟病的共同特徵及病程進展的中心始動因素，細胞凋亡是其重要途徑,闡明導致足細胞凋亡的機制是指導臨床治療和預後的重要手段。Girdin是骨架蛋白分子，也是細胞內重要的信號轉導分子，它位於蛋白酪氨酸激酶與 G 蛋白兩條信號通路的交叉點，多種生長因子包括IGF-1、VEGF 以及 EGF 等可通過 PI3K-Akt-Girdin 通路調節細胞的生長、移行等。有證據表明，PI3K/Akt信號系統可以通過mTOR的活化調節自噬。同時，Girdin也參與自噬的調節過程。本研究在對培養的足細胞經阿黴素刺激後其超微結構的觀察中發現，隨著阿黴素作用時間的延長，足細胞的自噬水平明顯升高。因此，本研究擬通過對Akt、mTOR、Girdin、LC3B等蛋白表達情況及相互之間關係的分析，探討足細胞調亡的發生機制。研究結果顯示，隨著阿黴素作用時間的延長，細胞早期凋亡和晚期凋亡的發生率均顯著升高。同時，隨著藥物作用時間的延長，足細胞中Girdin的表達水平逐漸升高，Akt和mTOR表達在各組中無顯著差別，而pAkt雖在阿黴素短時作用後無明顯變化，但隨著作用時間的延長，其表達明顯增加，而p-mTOR呈現先增加後下降的趨勢，Pro-Caspase、Active-Caspase及Caspase在藥物長時間作用後表達量顯著增加，而在對照組、6h組、12h組均未見表達。同時，自噬相關蛋白LC3B-Ⅱ隨藥物作用時間延長表達量增加。綜上提示，在阿黴素所致足細胞損傷過程中，Girdin表達上調引起Akt和mTOR磷酸化水平的升高，同時自噬水平顯著升高最終引起細胞凋亡的增加。本實驗為了解足細胞損傷時發生凋亡的分子機制提供了新的證據，對於進一步了解腎臟病的發生有指導意義。
