《GSK3β激酶調控SKAP蛋白磷酸化在有絲分裂中的功能研究》是依託中國科學技術大學，由王茜瑋擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：GSK3β激酶調控SKAP蛋白磷酸化在有絲分裂中的功能研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王茜瑋
- 依託單位：中國科學技術大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
在整個細胞複製周期的過程中，有絲分裂起承上起下的作用。如果其出現異常，可導致染色體不穩定性並促進腫瘤的發生和發展。SKAP是新近發現的一個定位於微管正末端的重要有絲分裂調控蛋白，我們已有的結果表明SKAP通過介導微管與動點之間的橋聯，調控紡錘體的可塑性，但是其具體的分子機制及其可塑性的動態調控機理仍未完全明了。本項目擬通過一系列先進的技術手段，系統地評估GSK3β激酶調控SKAP蛋白磷酸化在有絲分裂期的功能；我們還將利用生物光子學探針的方法闡明GSK3β激酶活性在細胞周期進程中的時空動力學特徵及其生理意義。此外，我們還將評估GSK3β磷酸化是否調節SKAP蛋白在細胞周期中的表達水平。相信本項目的順利實施將會加深我們對細胞有絲分裂過程的認識，為相關疾病的病因學和可能的臨床干預途徑提供科學依據。
結題摘要
在本項目的支持下，我們按照原定計畫出色地完成了各項任務。系統地評估了GSK3β激酶調控SKAP蛋白磷酸化在有絲分裂期的功能。在研究過程中我們鑑定出一個新的與SKAP有相互作用的蛋白Kif2b，初步闡明了其在體內功能發揮的調節機制，證明GSK3β通過對SKAP的磷酸化進而調控了Kif2b的活性。我們發現：SKAP與Kif2b的相互作用在有絲分裂期的中期最強，而GSK3β磷酸化SKAP進一步增強了SKAP與Kif2b的結合能力，從而降低了Kif2b的微管解聚酶活性。揭示了GSK3β-SKAP-Kif2b信號通路在保證有絲分裂紡錘體穩定性和染色體忠實分離過程中的作用。除了在有絲分裂期中對SKAP的研究，我們在間期對SKAP的功能也進行了探討。經過系統的研究分析，我們鑑定出一個新的複合物SKAP-IQGAP1，闡明了該蛋白複合物在細胞周期間期在體內的功能發揮及調節機制。我們發現：SKAP通過它的C端與IQGAP1的WWIQ結構域相互結合，而EGF的刺激會增強兩個蛋白之間的結合，促進SKAP在細胞膜褶皺處的富集；我們還發現SKAP參與了在EGF刺激下細胞的遷移過程，利用siRNA或shRNA敲低細胞內SKAP的蛋白水平會抑制細胞的遷移。除此以外，利用siRNA或shRNA敲低蛋白表達水平的方法以及可以透膜的TAT-WWIQ多肽的技術，我們證明了IQGAP1 和SKAP之間的相互作用對SKAP在膜褶皺處的富集以及細胞的定向遷移至關重要。
