GCS基因靶向miRNA對乳腺癌耐藥基因及藥物敏感性作用的研究

《GCS基因靶向miRNA對乳腺癌耐藥基因及藥物敏感性作用的研究》是依託山東大學，由孫妍琳擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：GCS基因靶向miRNA對乳腺癌耐藥基因及藥物敏感性作用的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：孫妍琳
• 依託單位：山東大學

中文摘要

化療是治療乳腺癌的重要輔助性手段，而多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)常使化療失敗，給乳腺癌的治療造成很大障礙。MDR是指腫瘤細胞對一種化療藥物出現耐藥性的同時,對其它未接觸過的、結構不同和靶位各異的化療藥物也具有交叉耐藥性。近年來葡萄糖神經醯胺合成酶(glucosylceramide synthase, GCS)介導的凋亡調控與MDR方面的研究引起了人們的關注。.miRNA(microRNA)能通過與靶mRNA特異性的結合引起其降解或抑制其翻譯。近來miRNA作為新的研究切入點，為腫瘤MDR的研究開闢了一條新途徑。本課題擬設計併合成GCS基因靶向的microRNA序列，構建miRNA的表達載體，轉染耐藥乳腺癌細胞和動物移植瘤模型，觀察GCS基因靶向的miRNA在體內外對GCS及相關乳腺癌耐藥基因及藥物敏感性的作用效果，為提高乳腺癌的化療效果提供新的途徑。

結題摘要

多藥耐藥（MDR）是乳腺癌化療失敗的主要原因，近年來，葡萄糖神經醯胺合成酶（GCS）介導的凋亡調控與MDR方面的研究引起了人們關注。microRNA是調控真核基因表達的重要分子，microRNA與基因治療及調控等方面日益受到重視。本研究首次構建含有特異性靶向GCS的microRNA表達載體，轉染了耐藥乳腺癌細胞，發現GCS靶向的microRNA表達載體明顯抑制了GCSmRNA和GCS蛋白的表達，利用MTT檢測發現，GCS靶向的microRNA表達載體轉染耐藥乳腺癌細胞後，細胞對長春新鹼、紫杉醇和阿黴素等化療藥物的耐藥性明顯降低，說明GCS靶向的microRNA能明顯抑制耐藥基因GCS的表達並顯著提高乳腺癌細胞對多種化療藥物的敏感性。通過檢測多藥耐藥基因1（mdr1）發現，GCS靶向的microRNA表達載體明顯下調了mdr1mRNA和P-糖蛋白（P-gp）表達水平，同時明顯抑制了P-gp外排功能。在體內實驗中，我們通過乳腺癌細胞動物移植瘤模型的建立， GCS靶向的microRNA在體內能夠有效抑制GCS 和 mdr1基因的表達。本研究為乳腺癌的臨床基因治療奠定了良好的實驗基礎，為提高乳腺癌的化療效果提供了新的途徑。