《GATA3-AS1在支氣管哮喘CD4+T細胞功能調控中作用機制的研究》是依託華中科技大學，由熊維寧擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：GATA3-AS1在支氣管哮喘CD4+T細胞功能調控中作用機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：熊維寧
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
Th2細胞和其它CD4+ T細胞亞群均參與了哮喘的發病機制。長鏈非編碼RNA（Long non-coding RNA，lncRNA）是長度大於200個核苷酸的非編碼RNA，在細胞增殖、分化等方面中發揮重要作用。lncRNA GATA3 antisense RNA1（GATA3-AS1）最近被發現特異性表達於Th2細胞，其功能還不清楚，在哮喘發病機制中有何作用尚未見報導。本項目將收集哮喘患者外周血CD4+ T細胞標本，檢測GATA3-AS1及相關細胞因子和轉錄因子的表達，並和臨床相關資料進行統計分析。在此基礎上開展體外細胞實驗進行功能和機制研究，通過分子生物學等方法研究GATA3-AS1對CD4+ T細胞亞群分化的調控及上游信號，並通過RNA酶保護實驗等技術研究其對GATA3的調控機制。本項目將首次闡明GATA3-AS1在哮喘發病機制中的作用，並為尋找新的分子標誌物和干預靶點提供實驗依據。
結題摘要
長鏈非編碼RNA（Long non-coding RNA，lncRNA）是長度大於200個核苷酸的非編碼RNA，在細胞增殖、分化等方面中發揮重要作用，但lncRNA在哮喘中的作用並不明確，本研究通過採集哮喘患者和健康志願者外周血中CD4+T細胞，進行Arraystar lncRNA晶片檢測。通過lncRNA晶片檢測發現lncRNAs的表達譜在哮喘患者外周血CD4+T細胞中發生顯著變化，表達有差異的lncRNAs總計2725個，其中哮喘患者與健康志願者相比863個lncRNAs表達上調，1862個表達下降。通過RT-PCR驗證後發現，與健康志願者相比，ENST00000444682在哮喘患者外周血CD4+T細胞中表達上升，而ENST00000566098、ENST00000583179、ENST00000579468表達下降。接下來通過ROC曲線分析上述lncRNAs在哮喘中的診斷價值，研究發現ENST00000444682/ENST00000583179可作為哮喘臨床診斷的指標，其曲線下面積為0.9441，敏感度為86.24%，特異度為96.88%。通過對臨床資料的分析發現，外周血CD4+T細胞中lncRNAs的表達與哮喘臨床特徵的相關性主要集中在FEV1%、FEV1/FVC、PEF、PD20、嗜酸性粒細胞比例和過敏性鼻炎病史。進一步研究發現ENST00000566098、ENST00000583179、ENST00000579468、 ENST00000444682的表達與外周血CD4+T細胞中Th2型細胞因子表達具有廣泛相關性。本項目首次在哮喘外周血CD4+T細胞中闡明lncRNAs在哮喘診斷中的作用，並為尋找新的分子標誌物提供實驗依據。除lncRNA外，我們也對其他的非編碼RNA進行了相關研究。我們發現miR-155在哮喘動物模型中表達明顯增加，給予攜帶靶向miR-155的shRNA的慢病毒載體降低miR-155表達後，能顯著降低哮喘動物模型的氣道周圍炎症細胞浸潤、Th2型細胞因子分泌以及氣道高反應性。此研究從治療的角度明確了miR-155在哮喘發病機制中的作用，明確提出miR-155可能作為新的治療哮喘的潛在靶點，具有潛在的臨床套用價值。
