FoxM1調控TGF-β1/Smad信號通路促進乳腺癌EMT機制研究

《FoxM1調控TGF-β1/Smad信號通路促進乳腺癌EMT機制研究》是依託同濟大學，由高勇擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：FoxM1調控TGF-β1/Smad信號通路促進乳腺癌EMT機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：高勇
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

上皮間質轉化（EMT）是腫瘤轉移的關鍵。TGF-β1/Smad是目前已知最重要的促EMT信號通路。最近的研究證實FoxM1也可致腫瘤EMT，機制不明。本課題組前期研究證實FoxM1在乳腺癌組織中高表達並可致乳腺癌細胞EMT，進一步觀察到FoxM1可與Smad3結合，敲除FoxM1可抑制TGF-β1激活所致的Smad3入核，表明FoxM1可能通過調控TGF-β1/Smad信號通路促進EMT。為此，本課題擬採用基因過表達和敲除技術觀察FoxM1對TGF-β1/Smad轉錄活性影響；構建FoxM1和Smad3不同突變體探討它們之間的關鍵結合位點；採用Co-IP、GST pulldown等觀察FoxM1對Smad3核轉位的作用；採用ChIP等技術對FoxM1/Smad3和EMT調控因子Slug的關聯進行探索。通過上述研究，闡明FoxM1調控TGF-β1/Smad機制及促EMT的作用。

結題摘要

TGF-β1/Smad信號通路在多種發育過程和包括腫瘤在內的疾病發生中發揮重要作用。該通路中SMAD蛋白的持續激活是該信號通路的一個主要特徵。上皮間質轉化（EMT）是腫瘤轉移的關鍵。TGF-β1/Smad 是目前已知最重要的促EMT信號通路。本項目中，我們通過細胞功能實驗和分子生物學手段闡述了癌基因FoxM1和TGF-β1/Smad信號通路以及EMT之間的調控關係，揭示了一種嶄新的調控網路。FoxM1的高表達和低表達促進乳腺癌細胞侵襲轉移，並且FoxM1高表達促進乳腺癌細胞EMT的發生，使E-cadherin降低而Vimentin升高。在TGF刺激下，我們發現FoxM1可與Smad3結合，敲除FoxM1 可抑制TGF-β1 激活所致的Smad3入核，表明FoxM1 可能通過調控TGF-β1/Smad 信號通路促進EMT。接著通過構建FoxM1和Smad3不同突變體探討它們之間的關鍵結合位點，實驗結果顯示SMAD3的C端和FoxM1的N端在它們結合時起關鍵作用；此外，我們還發現FoxM1通過直接結合Slug啟動子調控其轉錄，進而調控EMT的發生。本項目對TGF-β1/Smad 信號轉導通路的研究將有助於我們深入了解該信號通路與腫瘤EMT的關係，為制定和設計針對該信號通路的靶點藥物提供理論依據。