FYCO1 功能與白內障發病的分子機制研究

《FYCO1 功能與白內障發病的分子機制研究》是依託同濟大學，由陳建軍擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：FYCO1 功能與白內障發病的分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：陳建軍
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

FYCO1參與自噬，但具體功能尚不清楚。申請人首次在多個先天性白內障（CC）家系中發現FYCO1缺陷是其致病原因（已發表於Am J Hum Genet）。CC高度遺傳及臨床異質性，其致病分子研究仍必要。調節自噬已被認為是多種疾病治療的潛在靶點。本研究擬建立FYCO1表達異常的人晶體上皮細胞(HLE),在飢餓狀態或試劑誘導下誘發自噬，觀察FYCO1對HLE自噬活動的影響，然後進一步具體研究對蛋白自噬和細胞器自噬的影響。藉助酵母雙雜交系統篩選並鑑定小鼠晶狀體cDNA文庫中FYCO1結合蛋白，構建突變體並檢測突變是否影響蛋白間結合。建立FYCO1基因敲除小鼠並分析表型，觀察體內組織細胞自噬情況及FYCO1缺陷對自噬影響；晶狀體切片病理並檢測晶狀體白內障基因、細胞器標誌性基因及自噬過程關鍵性基因表達變化，揭示FYCO1缺陷在白內障發病的機制。為白內障非手術治療奠定基礎，同時豐富自噬通路分子機制。

結題摘要

先天性白內障的主要因素之一是遺傳，它是一組具有高度遺傳和臨床異質性的單基因遺傳病。課題負責人在前期研究中首次發現FYCO1缺陷是先天性白內障致病原因，但FYCO1的分子發病機制仍不清楚。我們採用CRISPR-Cas9編輯技術完成Fyco1基因敲除小鼠的建立，課題按照既定方案，圍繞課題宗旨（探討FYCO1的分子發病機制）對獲得的Fyco1基因敲除的小鼠進行一系列視力分析、組織切片分析等，揭示FYCO1缺陷在白內障發病的機制；同時，對已收集到的100例先天性白內障散發病例和或家系中先證者進行FYCO1突變篩查，在一個家系中鑑定了FYCO1突變，這將是在中國人群中首次發現。通過研究FYCO1分子的互作蛋白，我們發現一個在晶狀體發育過程中起重要作用的基因，並且發現該基因的突變在一個白內障家系中共分離，已用靶向高通量測序排除該家系已知白內障致病基因的可能，並通過外顯子測序進一步驗證該基因突變是這個家系的致病原因。