《FSP-1活化成纖維細胞促進肺纖維化的分子機制研究》是依託鄭州大學，由邊陽陽擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：FSP-1活化成纖維細胞促進肺纖維化的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：邊陽陽
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
成纖維細胞的活化在肺纖維化的發生和發展中發揮著關鍵作用。成纖維細胞特異性蛋白-1（FSP-1）通常被作為成纖維細胞的標誌物，用以研究成纖維細胞在纖維化中的作用。但是，FSP-1在纖維化中的作用卻鮮有研究。本課題組當前的工作發現，FSP-1可以活化肺成纖維細胞，FSP-1基因敲除小鼠的肺纖維化明顯減弱，腹腔注射FSP-1導致小鼠的肺纖維化加重。然而，尚不清楚FSP-1通過何種途徑激活肺成纖維細胞，進而導致膠原等基質蛋白的異常沉積。.本項目擬開展以下研究工作：（1）在細胞模型中利用磷酸化蛋白質組學技術，系統分析FSP-1調控成纖維細胞活化的信號通路。篩選靶標蛋白質、磷酸化位點和激酶，研究其表達和功能。（2）利用FSP-1敲除和野生型小鼠，研究干預FSP-1信號通路對肺纖維化的影響。本研究將有助於闡明FSP-1活化肺成纖維細胞促進肺纖維化的分子機制，為肺纖維化的臨床診治提供潛在的分子靶標。
結題摘要
本項目在細胞和動物實驗層次研究了成纖維細胞特異性蛋白-1（FSP-1）在肺纖維化發生髮展中的作用，以及FSP-1蛋白活化肺成纖維細胞促進肺纖維化的分子機制。發現臨床上特發性肺纖維化病人的FSP-1蛋白表達升高，FSP-1陽性巨噬細胞在博萊黴素誘導小鼠肺纖維化模型的肺組織中聚集。FSP-1陽性巨噬細胞大量表達並分泌FSP-1蛋白到細胞外，外源性FSP-1蛋白可以激活小鼠和人原代肺成纖維細胞。FSP-1蛋白處理肺成纖維細胞後，鞘氨醇-1-磷酸-磷酸酶1（SGPP1）蛋白的S101位點磷酸化豐度顯著上調，SGPP1的底物鞘氨醇-1-磷酸（S1P）含量提高。外源性S1P可以激活肺成纖維細胞，FSP-1可能通過S1P信號通路活化肺成纖維細胞。在博萊黴素誘導小鼠肺纖維化模型中，外源性FSP-1可以促進肺纖維化進展，FSP-1的中和抗體對肺纖維化有一定的緩解作用，肺纖維化小鼠的血液和肺組織中S1P分子的含量增加。上述結果表明，巨噬細胞分泌的FSP-1蛋白通過S1P相關信號通路激活肺成纖維細胞促進肺纖維化發生髮展，FSP-1蛋白可能通過S1P-S1P受體信號通路激活肺成纖維細胞，FSP-1蛋白不僅可以作為特發性肺纖維化的疾病標誌物，而且為肺纖維化的早期診斷和治療提供了一個新的靶點。在研究過程中，發現納升色譜存在著分析通量低和穩定性差的缺點，嚴重阻礙了臨床蛋白質組學的研究。搭建了基於微升色譜（1000 µm i.d., 50 µl/min）的蛋白質組學分析平台，在兼顧靈敏度的情況下，提高了分析通量和穩定性，極大的提高了質譜儀的使用效率。該微升色譜系統在世界上首次實現了同一根色譜柱分析＞10,000個蛋白質組學樣品，可以替代納升色譜進入常規實驗室用於蛋白質和代謝組學研究。發表論文7篇，其中SCI論文4篇，中文核心2篇，國際會議1篇，國內會議論文1篇，協助培養博士研究生2名。
