《FOLR1通過調節EGR1及其信號分子參與鼻咽癌紫杉醇耐藥的機制》是依託中南大學，由李維擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：FOLR1通過調節EGR1及其信號分子參與鼻咽癌紫杉醇耐藥的機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李維
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
葉酸受體1（FOLR1）是細胞攝取葉酸的高親和性受體，前期研究發現FOLR1的表達與鼻咽癌的發生及紫杉醇耐藥表型密切相關，且早期生長反應因子1（Egr1）隨FOLR1表達變化而變化。本項目將以鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系及相應的親本細胞係為研究對象，從Egr1信號通路作用為切入點。套用cDNA microarray觀察FOLR1表達變化對Egr1信號通路的影響；磷酸化抗體蛋白質雜交檢測Egr1上游分子活化，免疫螢光共聚焦顯微鏡檢查Egr1核遷移活性；EMSA檢測Egr1的DNA結合活性；裸鼠體內觀察FOLR1抑制後Egr1信號通路改變以及移植瘤對化療的敏感性；在臨床中收集鼻咽癌紫杉醇耐藥標本和敏感標本，檢測FOLR1及Egr1信號通路表達差異。該項目將闡明FOLR1如何通過調節EGR1信號通路參與鼻咽癌紫杉醇耐藥的機制，為逆轉耐藥提供依據。
結題摘要
鼻咽癌是鼻咽部常見的惡性腫瘤，在我國頭頸部惡性腫瘤中發病居首位，放療、化療是治療鼻咽癌的主要手段，紫杉醇是臨床常用的化療藥物之一，在放療的同時使用紫杉醇進行化療，可以改善鼻咽癌患者的遠期生存率，可見化療是鼻咽癌綜合治療的重要手段之一。然而，在化療過程中出現的腫瘤耐藥問題常常是引起治療失敗的主要原因，其耐藥產生的分子機制十分複雜。本課題組前期發現FOLR1的表達與鼻咽癌紫杉醇耐藥密切相關，隨後研究發現FOLR1引起的鼻咽癌紫杉醇耐藥表型與其葉酸轉運功能無關。本文將以鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞係為研究對象，套用RNA干擾技術干擾FOLR1基因的表達後，人類全基因組表達譜晶片篩選FOLR1干擾前後在鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞中的差異表達基因，結果發現EGR1基因在兩個鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系中均表達下調且下調倍數最高，接著套用免疫共沉澱技術驗證FOLR1與EGR1在鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系中存在蛋白質互動作用，然後通過干擾和過表達EGR1基因，再用不同濃度的紫杉醇刺激，分別套用MTT法和平板集落形成實驗檢測其對紫杉醇敏感性的變化，結果發現干擾EGR1基因的表達後細胞對紫杉醇敏感性增加，而將EGR1基因過表達後細胞對紫杉醇的敏感性降低，提示EGR1可能是通過與FOLR1的互動作用，誘導和調節下游與腫瘤細胞生長或凋亡相關的信號分子而參與了鼻咽癌紫杉醇耐藥，EGR1可能是鼻咽癌紫杉醇耐藥逆轉的理想靶點。同時利用對鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系（CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol）的 miRNA 晶片分析，獲得表達下調明顯的 miRNAs 的相關信息，驗證當上調其表達時能對紫杉醇耐藥有抑制作用。其中，hsa-miR-31-3p可能通過調節靶基因從而影響鼻咽癌細胞化療耐藥性，為逆轉鼻咽癌細胞紫杉醇耐藥的靶基因治療提供信息。
