《FHL1通過抑制微管的形成負向調控細胞周期》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由丁麗華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：FHL1通過抑制微管的形成負向調控細胞周期
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：丁麗華
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
FHL1 屬於FHL家族，在腫瘤的發生髮展中具有重要作用。我們利用免疫共沉澱、蛋白雙向電泳和質譜技術獲得了與FHL1結合的蛋白b-tubulin。b-tubulin是一種微管蛋白，在細胞中與a-tubulin形成異源二聚體，異源二聚體頭尾相連聚合形成微管(Microtubule, MT)。微管結構的不穩定與腫瘤相關，抗微管類化療藥物在腫瘤治療中發揮了重要作用。我們發現，FHL1在細胞內外都可與a/b-tubulin相互作用並能調節a/b-tubulin蛋白表達，FHL1過量表達抑制微管的恢復，並使細胞生長阻滯在G2/M期。我們將利用微管形成實驗、免疫螢光技術、流式細胞技術、亞細胞定位分析、免疫組織化學技術、細胞生物學效應檢測技術等確定FHL1在微管形成中的作用及機制，以及FHL1在腫瘤細胞周期調節中的作用及與tubulin表達相關性在臨床上的意義，為發現新的抗微管類藥物提供依據。
結題摘要
我們利用GST pull-down、免疫共沉澱和雷射共聚焦實驗證明了FHL1與a/b-tubulin及微管的相互作用，並進一步定位了它們之間相互作用的區域。進一步研究發現，FHL1在許多細胞系中都抑制微管的乙醯化，並發現FHL1抑制微管的乙醯化是通過促進FHL1與a-tubulin與HDAC6的結合實現的。因為微管的穩定性與其乙醯化相關，我們檢測了FHL1對微管組裝及穩定性的影響。體內外實驗證明，FHL1抑制微管的形成和穩定。利用p38抑制劑以及RNAi干擾技術發現，FHL1通過調節MEKK4-MKK3-p38信號途徑，促進tau的磷酸化，從而抑制微管的組裝。
