《Ezh2調控牙髓損傷修復的分子機制》是依託四川大學，由葉玲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Ezh2調控牙髓損傷修復的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：葉玲
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
調控牙髓幹細胞的分化是牙髓損傷修復的關鍵，表觀遺傳調控在幹細胞命運決定中具有十分重要的作用。Ezh2是一種組蛋白甲基轉移酶，與幹細胞的分化密切相關。Ezh2在間充質幹細胞礦化過程中表達下調，通過調控核轉錄因子的表達調控其分化。我們前期研究發現，炎性刺激下牙髓細胞中Ezh2的表達下調，提示其參與了牙髓損傷修復中的分子細胞事件。本項目在此基礎上，通過構建Ezh2過表達和沉默質粒，觀察其對牙髓幹細胞增殖分化的影響；同時通過構建Ezh2酶活性缺失的質粒，研究Ezh2的組蛋白甲基轉移酶活性是否為這個過程所需；採用轉錄因子活性晶片，結合生物信息學分析，篩選Ezh2在牙髓幹細胞中調控的靶基因，並通過螢光素酶報告基因和染色質免疫共沉澱技術研究調控機理；通過基因修飾牙髓幹細胞體內礦化實驗驗證Ezh2在牙髓損傷修復中的作用。本項目的實施有助於闡明牙髓損傷修復過程中表觀遺傳調控因子的作用，充實牙髓生物學理論。
結題摘要
調控牙髓幹細胞的分化是牙髓損傷修復的關鍵，表觀遺傳調控在幹細胞命運決定中具有十分重要的作用。Ezh2是一種組蛋白甲基轉移酶，Ezh2不僅參與調控不同細胞的增殖和分化，還參與調控牙髓炎症修復過程。本項目構建了Ezh2過表達、Ezh2酶活性缺失和Ezh2沉默病毒，觀察其對牙髓幹細胞炎症、增殖、分化的影響，及影響機制。結果發現牙髓炎症時Ezh2表達下調，Ezh2可以通過調節炎性因子表達而促進牙髓炎症發生，Ezh2抑制劑則可以減輕牙髓炎症程度；Ezh2沉默後，牙髓幹細胞的增殖能力明顯下調，機制研究發現Ezh2不通過組蛋白甲基化轉移酶活性功能調控牙髓幹細胞進入細胞增殖周期，而通過調控PCNA和DNA聚合酶δ的結合來調控DNA擴增過程；Ezh2沉默後，牙髓幹細胞的骨向分化能力明顯增強，機制研究發現Ezh2通過甲基化轉移酶活性調控β-catenin的的表達，調控WNT經典信號通路，從而調控分化過程。本項目首次提出Ezh2抑制劑可能成為臨床上用來抑制牙髓炎症的藥物，為牙髓炎治療開闢了研究方向；首次發現Ezh2可以通過調節PCNA和DNA聚合酶δ的結合，從而調節DNA合成；Ezh2可以通過調節β-catenin的轉錄，調控牙髓幹細胞的分化過程，有助於闡明牙髓損傷修復過程中表觀遺傳調控因子的作用，充實牙髓生物學理論。
