《Exosome內非編碼RNAs檢測在胃癌診療中的套用及機制》是依託江蘇大學，由許文榮擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Exosome內非編碼RNAs檢測在胃癌診療中的套用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：許文榮
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Exosome內非編碼RNA（miRNA和lncRNA）作為一種新的非創傷性分子標誌物在腫瘤診療中的作用備受關注。我們檢測到胃癌微環境間質幹細胞分泌的exosome內miR-423-5p及7SKRNA等非編碼RNAs在胃癌患者血清exosome內顯著增高，並發現miR-423-5p可促進胃癌細胞轉移及上皮細胞間質化，但其在胃癌診療中的套用價值還有待評估。本研究擬採用qRT-PCR方法檢測胃癌患者血清exosome內miR-423-5p及7SKRNA等非編碼RNAs的表達水平，建立分子實驗室診斷新技術，與傳統方法比較並進行方法學評價，評估其單獨和聯合檢測在胃癌診療中的套用價值；採用基因轉染及CRISPR/Cas9基因敲除技術，結合細胞和動物模型解析exosome內miR-423-5p及7SKRNA在胃癌轉移中的作用及機制。將為胃癌診療提供新技術和分子標誌，為胃癌診治提供新靶標，具有重要意義。
結題摘要
Exosome內非編碼RNAs和蛋白質在腫瘤的診斷、療效觀察及預後判斷中具有潛在的臨床套用價值。本項目前期檢測到胃癌微環境間質幹細胞分泌的exosome內miR-423-5p及RMRP在胃癌患者血清exosome內顯著增高。在此基礎上，本研究擴大樣本量進行驗證，成功提取胃癌患者及健康體檢者血清來源exosome、胃癌細胞及胃黏膜上皮細胞來源exosome。血清及細胞來源的exosome為圓形或橢圓形小囊泡，直徑介於40~150nm，表面表達CD9、CD63分子。胃癌患者血清exosome內miR-423-5p的表達水平較健康體檢者顯著升高。胃癌患者及健康體檢者聯合胃癌細胞及胃黏膜上皮細胞共同驗證血清及細胞來源的exosome內miR-423-5p表達具有顯著差異。ROC曲線分析其診斷效能高於胃癌傳統腫瘤標誌物CEA、CA-199。結合胃癌患者臨床病理資料分析發現，胃癌患者血清exosome內miR-423-5p的表達水平與淋巴結轉移顯著相關，而與性別、年齡、腫瘤直徑大小、分化程度和TNM分期無關。Exosome能夠傳遞miR-423-5p至胃癌細胞發揮促胃癌增殖及轉移的作用。生物信息學軟體預測結合實驗驗證確定miR-423-5p候選靶基因為SUFU，miR-423-5p通過與SUFU的mRNA3’-UTR位點結合靶向負調控SUFU。胃癌血清exosome內RMRP表達明顯高於健康體檢者血清exosome，並且在胃癌細胞來源exosome內RMRP的表達也較胃黏膜上皮細胞增高。Exosome能夠介導RMRP的傳遞，促進胃癌的增殖和遷移能力。項目拓展了exosome內其他分子標誌物的研究如TRIM3等。本研究為臨床exosome常規檢測研究提供實驗室新方法，為胃癌診斷提供新型非創傷性分子標誌物，為胃癌的治療提供新的靶點，具有重要的科學意義和臨床套用前景。本項目累計發表14篇SCI論文（6篇影響因子大於5,2篇影響因子大於10）和1篇中文核心期刊；獲得科技獎勵4項；參加國內外學術交流7次；培養博士研究生3名，碩士研究生4名。項目投入經費60.0000萬元，支出52.0821萬元，各項支出基本與預算相符。
