Exosome介導ALA光動力抑制皮膚鱗癌生長的分子機制研究

《Exosome介導ALA光動力抑制皮膚鱗癌生長的分子機制研究》是依託同濟大學，由王秀麗擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Exosome介導ALA光動力抑制皮膚鱗癌生長的分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：王秀麗
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

ALA-PDT能有效治療皮膚鱗狀細胞癌 (SCC)，但其機制仍不完全清楚。本課題組前期研究觀察到ALA-PDT可以明顯促進SCC分泌exosome，PDT後SCC細胞分泌的exosome可明顯抑制SCC細胞體外增殖，下調細胞內ERK的表達。由於exosome是調節細胞間相互作用的重要媒介，鱗癌中ERK的表達受miR-124調控。由此推測，exosome可能通過轉移miR-124，在ALA-PDT抑制皮膚腫瘤生長中發揮重要作用。為證實以上假設，本項目擬在已培養小鼠皮膚鱗癌細胞及前期研究基礎上，進一步研究exosome在ALA-PDT抑制SCC生長中的作用及機制；在對exosome成分分析的基礎上，重點研究miR-124的作用及分子機制。本項目的完成，有助於深入認識ALA光動力抑制皮膚鱗癌生長的機制，為提高ALA-PDT治療SCC的臨床療效提供新的理論基礎。

結題摘要

背景：ALA-PDT能夠誘導抗腫瘤免疫，但對於ALA-PDT處理後鱗癌細胞分泌的exosome是否改變及其對腫瘤細胞和腫瘤微環境中其他細胞的作用尚未見報導。 目的：探究ALA-PDT對小鼠鱗癌細胞、成纖維細胞分泌的exosome的改變，並研究該exosome對鱗癌細胞和腫瘤微環境的作用。 方法：在已建立SKH-1無毛小鼠SCC (Squamous cell carcinoma)模型基礎上，原代培養小鼠皮膚鱗癌細胞，提取及鑑定小鼠鱗癌細胞來源exosome，探究ALA-PDT對小鼠皮膚鱗癌細胞、成纖維細胞分泌exosome的影響。分別研究ALA-PDT處理的小鼠皮膚鱗癌細胞exosome對皮膚鱗癌細胞、成纖維細胞、樹突狀細胞的影響。 結果: 成功從小鼠皮膚鱗癌組織中獲得皮膚鱗癌細胞，生長良好，連續傳代。通過透射電鏡，粒徑分析、Western Blot檢測exosome表面標誌性蛋白鑑定，ExoQuick-TC試劑盒成功提取鱗癌細胞分泌exosome。ALA-PDT處理後的小鼠皮膚鱗癌細胞株、原代小鼠皮膚鱗癌細胞，小鼠成纖維細胞株來源的exosome濃度較未經ALA-PDT處理組exosome蛋白濃度升高。ALA-PDT處理鱗癌細胞來源的exosome對於鱗癌細胞無明顯的增殖及殺傷作用。ALA-PDT處理皮膚鱗癌細胞來源的exosome無法促進或抑制成纖維細胞分泌IL-6、VEGF。但是可以促進成纖維細胞分泌TGF-β1。Exosome可以被小鼠骨髓來源未成熟樹突狀細胞所攝取，並可刺激其表型成熟及功能成熟。 結論：ALA-PDT可以促進鱗癌細胞及成纖維細胞分泌exosome。ALA-PDT後鱗癌細胞分泌的exosome可被鱗癌細胞和DC細胞攝取，對鱗癌細胞無直接殺傷作用，但可促進成纖維細胞分泌TGF-β1，同時可以促進DC細胞的表型和成熟。本研究通過不同角度提供了了ALA-PDT治療皮膚鱗癌的免疫學新方向，為今後在ALA-PDT治療鱗癌的免疫機制研究提供新思路。