《Ephrin-A3/EphA4對視神經損傷後內源性視網膜幹細胞的作用研究》是依託北京大學，由朱瑞琳擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Ephrin-A3/EphA4對視神經損傷後內源性視網膜幹細胞的作用研究
- 項目負責人：朱瑞琳
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
視神經外傷、青光眼等疾病導致的視神經損傷是造成患者視力下降甚至失明的原因。由於視神經損傷後不能再生，這類疾病往往會造成不可逆的視覺損害。雖然在哺乳動物眼記憶體在一些神經幹細胞樣的細胞，但視神經損傷後，這些細胞並不能發揮視網膜幹細胞功能進行神經再生。我們前期研究顯示，ephrin-A3/EphA4是視網膜神經幹細胞的抑制因素，對其作用進行抑制，可能是保護視神經和視網膜神經節細胞，促進視神經再生的有效手段。本課題擬利用視神經損傷模型，研究ephrin-A3/EphA4在視神經和視網膜神經節細胞損傷過程中的作用，並嘗試通過套用EphA4-Fc抑制EphA4的作用，激活視網膜內的神經幹細胞，促進視網膜神經節細胞和視神經的再生，探討視網膜神經幹細胞再生的抑制因素及其作用機制，為視神經損傷和視網膜神經節細胞變性疾病的治療提供新的思路。
結題摘要
眼部外傷、青光眼等疾病均可造成視神經或視網膜神經節細胞的損傷，人類視神經與神經節細胞一旦損傷，便無法再生修復，因此往往造成患者不可逆性的視力損傷，甚至失明。研究表明，視網膜 Müller細胞具有神經祖細胞作用，但通常情況下，這些細胞並不能發揮視網膜幹細胞功能以進行神經再生。我們前期研究結果顯示，Ephrin-A3/EphA4是視網膜神經幹細胞的抑制因素，對其作用進行抑制可能是保護視神經和RGC、促進視神經再生的有效手段。本研究建立小鼠視神經損傷模型，在視神經損傷後不同時間點，通過實時螢光定量PCR檢測Ephrin-A3、EphA4、祖細胞相關基因（如Pax、Sox2和Chx10）、生長相關蛋白（如Gap 43和Sprr 1a）以及神經營養因子（如Cntf、Bdnf、Fgf2和Lif）等的mRNA表達水平，通過視網膜組織鋪片檢測RGC的數目變化，通過冰凍切片觀察Ephrin-A3、EphA4、Müller 細胞的變化，視神經纖維的再生情況以及Müller 細胞的增殖。通過向小鼠玻璃體腔內注射EphA4-Fc抗體以拮抗EphA4的抑制作用，觀察視神經損傷後視網膜內相關蛋白的表達變化及神經再生情況。本研究結果顯示，視神經損傷後，Gap43、Sprr1a的表達顯著增加，Fgf-2、Cntf、Bdnf的表達均升高。利用EphA4-Fc拮抗EphA4的作用後，Gap43、Sprr1a、Cntf、Bdnf的表達均顯著升高，RGC細胞數量較PBS對照組顯著增加，視神經損傷部位後方可見少量螢光標記的軸突延伸。本研究通過去除抑制因子，激活內源性神經幹細胞，對視網膜神經節細胞進行保護，並促進視神經的再生，有望為視神經損傷疾病提供新的治療方法。
