《EphA2介導EB病毒感染鼻咽上皮細胞》是依託中山大學，由張華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：EphA2介導EB病毒感染鼻咽上皮細胞
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張華
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
EB病毒是最早發現的人類腫瘤病毒，與鼻咽癌的發生髮展密切相關。由於缺乏cell-free EB病毒高效感染的上皮細胞模型，其感染鼻咽上皮細胞的機制仍不清楚。我們在前期研究中發現，EGF顯著增加EB病毒感染鼻咽上皮細胞；進一步採用人類全基因組表達譜晶片、siRNA干擾和質粒過表達等方法，初步鑑定EphA2是EB病毒感染鼻咽上皮細胞潛在的受體。本項目將在前期結果基礎上，擬採用免疫共沉澱、抗體中和及共定位等方法，進一步確認EphA2是否是EB病毒感染鼻咽上皮細胞的受體，並鑑定與其相互作用的糖蛋白；同時運用胞內段缺失型EphA2、siRNA干擾、抑制劑、回復實驗、共定位及體外轉錄翻譯系統等技術，初步闡明EphA2介導EB病毒感染的機制；通過阻斷實驗，評價EphA2作為靶點在抗EB病毒感染中的作用。因此，本項目的實施在EB病毒感染鼻咽上皮細胞機制的研究和抗EB病毒感染藥物的開發中都具有重要意義。
結題摘要
EBV感染全球90%以上成年人。研究表明EBV與伯基特淋巴瘤、鼻咽癌和10%的胃癌發病密切相關。因此，闡明EBV感染上皮細胞機制對於鼻咽癌和胃癌的預防尤為重要。本項目旨在鑑定EBV感染上皮細胞的關鍵受體，初步闡明EBV感染上皮細胞的分子機制，並最終探索抵抗EBV感染上皮細胞的手段。我們在前期研究中發現表皮生長因子促進EBV感染鼻咽上皮細胞。本項目在此基礎上，採用基因表達譜晶片和RNA沉默技術初步鑑定EphA2是EBV感染上皮細胞的宿主因子。Crispr/cas9技術敲除EphA2顯著降低EBV感染上皮細胞，而過表達EphA2則增強EBV感染。EphA2中和抗體、配體EphrinA1及抑制劑2,5-dimethylpyrrolyl benzoic acid顯著阻斷EBV感染。機制研究表明，EphA2直接結合EBV糖蛋白gB和gH/gL並促進EBV內吞和融合。進一步研究發現EphA2胞外段的EBD和FNR結構域對其介導EBV感染極為關鍵，而胞內段結構域則可有可無。本項目成功鑑定了EBV感染上皮細胞的首個功能受體，揭示了EphA2介導EBV進入的分子機制，並發現了數個阻斷EBV感染的抑制劑。因此，該研究從基礎醫學和轉化醫學層面，完善了EBV進入上皮細胞的機制，並為EBV感染的干預提供實驗依據。
