《ETK/EZH2信號通路調節膀胱癌細胞侵襲轉移的實驗研究》是依託中山大學，由郭勝傑擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ETK/EZH2信號通路調節膀胱癌細胞侵襲轉移的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：郭勝傑
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
膀胱癌侵襲轉移分子機制的研究是泌尿系腫瘤領域的熱點。有研究表明表皮酪氨酸蛋白激酶（ETK）高表達於多種腫瘤細胞和組織，並在腫瘤發生和發展過程中發揮重要作用。本課題組首次發現ETK高表達於人膀胱癌細胞和組織，並與膀胱癌細胞的侵襲轉移能力相關，進一步研究發現ETK可與一種組蛋白甲基轉移酶EZH2相互作用，並增加其蛋白質穩定性，而EZH2是一種甲基化轉移酶，其高表達於包括膀胱癌等多種腫瘤組織並與疾病進展相關，因此本課題擬首先套用體內外實驗模型探討ETK/EZH2信號通路在膀胱癌細胞侵襲和轉移過程中的作用，其次通過檢測ETK對EZH2下游相關蛋白H3K9，H3K27，E-cadherin和TIMP2的調節，闡明ETK調節膀胱癌細胞侵襲轉移的分子機制，最後檢測ETK/EZH2信號通路相關分子在膀胱癌組織標本中的表達相關性和臨床套用價值，進而為膀胱癌尋找新的治療靶點奠定基礎。
結題摘要
本項目旨在探討ETK調節膀胱癌細胞侵襲轉移的分子機制。ETK是一種-酪氨酸蛋白激酶，在多種實體瘤中高表達，並且參與調節腫瘤細胞的生物學行為。最近報告ETK抑制劑CTA095具有抑制腫瘤細胞和血管生成作用，具有成為潛在的腫瘤靶向藥物。本課題組前期研究表明ETK高表達於膀胱癌細胞和組織，並且和膀胱細胞的侵襲轉移相關。進一步研究發現ETK可以與EZH2相互作用，並且增加其蛋白穩定性，但具體機制不明，因此探討ETK/EZH2信號通路在膀胱癌中的作用可進一步揭示膀胱癌的侵襲轉移的機制。 本項目究通過細胞和動物的體內外實驗和人體組織標本研究有以下發現： 一、ETK可以和EZH2內源性和外源性相互作用，磷酸化EZH2，穩定EZH2蛋白，並且調節EZH2下游H3M27K表達。 在膀胱癌T24細胞中ETK可與EZH2相互作用，進一步在293細胞中通過過表達ETK和EZH2得到驗證，提示ETK和EZH2在體內具有相互作用，並可能相互調節。探討不同的ETK結構域和EZH2相互作用，發現PH和KD結構域與EZH2相互作用，因此ETK的磷酸化功能可能參與調解EZH2。而在293細胞中共表達有酶活性的ETK和沒有酶活性的ETK，發現有酶活性的ETK可以磷酸化EZH2，沒有酶活性的ETK不能磷酸化EZH2，而磷酸化EZH2可以使其下游的H3M27K水平上調，並且ETK可以穩定EZH2的蛋白質，因此ETK具有和EZH2相互結合，並調節EZH2的功能，ETK/EZH2信號通路可能在膀胱癌的侵襲轉移過程中具有重要作用。 二、EZH2在膀胱癌細胞中的表達和生物學作用。 在多種膀胱癌細胞中均檢測到EZH2表達，下調膀胱癌細胞T24細胞的EZH2後其體外侵襲和轉移能力下降，而下調T24細胞的EZH2表達其在裸鼠體內的成瘤能力也下降。EZH2在膀胱癌中的作用提示ETK及通過調節EZH2的功能在調節膀胱癌細胞侵襲和轉移過程中發揮作用。 三、ETK在膀胱癌組織細胞核中的表達及意義。 前期研究表明ETK高表達於膀胱癌組織細胞的胞漿，並與腫瘤的分期和預後相關。進一步研究發現ETK也表達於細胞核。多個細胞系和人體膀胱癌組織的檢測提示ETK也表達於膀胱癌細胞的細胞核。通過組織晶片檢測ETK的表達，結果提示細胞核中ETK的表達與腫瘤的分級和分期相關、腫瘤的復發和生存相關（p＜0.05），提示ETK在細胞核的表達也可以預測膀
