《EGFRvⅢ-scFv/IP-10納米顆粒促進膠質瘤/DC疫苗抗腦膠質瘤研究》是依託華中科技大學，由姜曉兵擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：EGFRvⅢ-scFv/IP-10納米顆粒促進膠質瘤/DC疫苗抗腦膠質瘤研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：姜曉兵
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
如何提高膠質瘤致敏的樹突狀細胞（DC）疫苗在體內的抗癌活性是亟待攻克的難題。本課題在前期工作基礎上，用已構建好的IP-10基因真核表達載體和抗EGFRvⅢ單鏈抗體（EGFRvⅢ-scFv）修飾的殼聚糖納米粒子反應製備成EGFRvⅢ-scFv/IP-10納米顆粒。將該納米顆粒轉染正常細胞和腫瘤細胞，進一步完善體外實驗及其相關研究。套用已建立的小鼠腦膠質瘤模型，將納米顆粒導入體內通過與腫瘤細胞表面的EGFRvⅢ受體特異結合，使腫瘤部位獲得高濃度IP-10，從而通過IP-10將膠質瘤/DC疫苗產生的膠質瘤特異性CTL富集至膠質瘤細胞周圍，並增強他們抗癌活性，形成數個以EGFRvⅢ陽性細胞為中心的CTL殲滅腫瘤的主戰場，最終實現抗膠質瘤效應。在此基礎上，我們將進一步系統研究該反應器發生效應的分子免疫學機制。該研究將為其儘早套用於膠質瘤臨床治療奠定堅實的理論和實驗基礎。
結題摘要
本課題在前期研究工作基礎上，用已經構建好的IP-10基因真核表達載體和抗EGFRvIII的單鏈抗體EGFRvIII-scFv修飾的殼聚糖納米粒子反應製備成EGFRvIII-scFv/IP-10納米顆粒，通過抗原抗體結合實驗和趨化實驗證實該納米粒子能與表達EGFRvIII的膠質瘤細胞特異性結合，同時具有趨化淋巴細胞的作用。為提高腦膠質瘤致敏的樹突狀細胞（DC）疫苗在體內的抗癌活性，我們用淋巴細胞分離液將人臍帶血的淋巴細胞分離出來，然後用磁珠分選法分選出淋巴細胞中的DC細胞，與腦膠質瘤裂解肽共同孵育得到膠質瘤/DC疫苗，並與T淋巴細胞共同培養3-4周，得到腫瘤特異性CTL細胞，通過ELISPOT檢測法和胞內細胞因子檢測法，檢測到擴增的CTL對膠質瘤細胞刺激後能大量分泌細胞因子IFN-γ和IL-2，並用51Cr釋放法檢測到CTL對特異靶細胞具有殺傷效應，而對非靶細胞及其對照細胞無殺傷效應，為進一步證實其體內抑制腫瘤的效果，我們建立了BABL/C/Nude nu裸鼠腦膠質瘤模型，通過尾靜脈注射EGFRvIII-scFv/IP10納米顆粒和膠質瘤DC疫苗，與對照組比較，觀察到裸鼠的生存周期明顯延長，並將腫瘤取出後，用流式細胞儀檢測到腫瘤浸潤的T淋巴細胞較不含腫瘤的對側腦組織明顯增多。因此，我們構建的EGFRvIII-scFv/IP-10納米顆粒不僅能提高膠質瘤/DC 疫苗抗腫瘤活性，而且將先前經顱給藥改為靜脈給藥，為後期套用於臨床奠定了堅實的基礎。
