《EB病毒啟動子的變異及其在鼻咽癌中的意義》是依託中山大學，由買世娟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：EB病毒啟動子的變異及其在鼻咽癌中的意義
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：買世娟
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們已經證明了鼻咽癌相關的突變型EBV核抗原1與EBV增強子FR的結合能力，以及轉錄激活能力均明顯增強，那么，在鼻咽癌細胞中EBV的啟動子區域內是否有特異性的核苷酸變異？我們的研究首次發現EBV的Q啟動子區有兩個與鼻咽癌相關的突變位點，其中+1G＞C的突變能明顯增強啟動子的轉錄活性。通過計算機輔助預測+1G＞C突變位點位於一個潛在的熱休克因子1（HSF1）結合序列內，進一步的實驗證實HSF1對Qp有轉錄激活作用。同時，我們在EBV的Cp和LMP1-TR啟動子區也發現了鼻咽癌特異性的變異位點，且均對啟動子的轉錄活性有明顯影響。本課題擬採用報告基因實驗、EMSA和CHIP等方法，檢測EBV啟動子的變異對潛在的轉錄因子結合位點的影響，以期闡明突變型的EBV啟動子在EBV基因表達中的作用，為確立EBV在鼻咽癌中的致瘤作用提供更充分的科學依據。
結題摘要
EB病毒（Epstein-Barr virus, EBV）與鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma, NPC）有密切的相關性。我們以往的研究發現，V-val突變型的EB病毒核抗原1（EBV encoded nuclear antigen 1, EBNA1）基因與NPC有密切的聯繫。那么，在EB病毒的啟動子區域有無特異性的鹼基變異，其變異在EBV相關腫瘤發生中的意義如何？我們檢測了EBV啟動子Cp和Qp的鹼基序列。發現在NPC中，Qp序列常有-197 G＞A和+1 G＞C的特異性突變，Cp常有-12G＞T和+69 C＞T的特異性突變。並且Qp+1C的變異可以顯著提高Qp的活性，而Cp+69T的變異可以顯著降低Cp的活性。EBV啟動子從Cp到Qp的轉換是癌變過程中的重要一步，因此，NPC組織中Cp活性的下降以及Qp活性的升高在腫瘤的發生中具有重要的意義。此外，我們預測到Qp+1G＞C突變點正好位於一個潛在的熱休克元件區域內。在熱休克作用下，EBV+細胞株中從Qp起始的EBNA1轉錄量明顯增加。EMSA和ChIP試驗驗證了熱休克因子1（HSF1）與Qp的結合能力。我們發現了能調控Qp活性和EBNA1蛋白表達的一個新的轉錄因子 — HSF1，HSF1通過結合於Qp序列上的熱休克元件而發揮轉錄激活作用。EBNA1是唯一在EB病毒相關腫瘤細胞中均有表達的蛋白，對於EB病毒的感染、複製和基因表達有重要的作用。HSF1誘導的EBNA1表達可能在癌變早期有重要的作用。我們還檢測了NPC中潛伏膜蛋白1（latent membrane protein 1,LMP1）啟動子L1-TR的序列。與原型相比，鼻咽癌組織中的L1-TR啟動子區域有多處缺失、插入和點突變，且啟動子活性明顯降低。LMP1 的低表達可能通過減少其本身的細胞毒性和逃避機體的免疫監控等機制而有利於EB 病毒的潛伏感染，進而促進了鼻咽上皮的惡性轉化。以上研究成果分別發表於《Virology》，《Eur Arch Otorhinolaryngol》和《中山大學學報（醫學科學版）》。為了更進一步地研究探討鼻咽癌癌變的分子機制，我們又檢測了鼻咽癌中microRNA的表達情況以及相應的microRNA與腫瘤轉移、預後和治療反應性的關係。研究成果分別發表於《Cancer Lett》和《J Transl Med》。
