《Dlx5/6通過調控PV中間神經元改變染鉛幼鼠行為學的機制研究》是依託四川大學，由江詠梅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Dlx5/6通過調控PV中間神經元改變染鉛幼鼠行為學的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：江詠梅
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鉛是一種神經毒性重金屬元素，其對中樞神經系統造成的損傷是不可逆的。鉛中毒可以導致兒童認知能力降低和行為學改變。目前針對鉛的神經毒性機制研究多集中於認知能力方面，尚無針對行為學改變機制的研究。本課題前期研究發現鉛可導致幼鼠腦組織中參與調控機體行為的PV中間神經元數量減少，結合基因晶片結果和文獻報導，Dlx5/6基因可能在調控該神經元增殖分化中起重要作用。因此推測：鉛可能通過下調Dlx5/6使PV中間神經元減少，最終導致行為發生改變。本次研究擬通過從細胞和動物水平敲除/轉染Dlx5/6基因等實驗觀察PV中間神經元數量及功能變化，以確定該基因的作用；並通過檢測兒童腦組織中與PV中間神經元相關的γ-GABA和5-HT兩個指標的釋放情況，判斷人體內中間神經元是否也存在同樣的改變，進而將揭示兒童鉛中毒誘發行為學改變的重要分子機制，為治療這一毒性作用提供堅實可靠的理論基礎。
結題摘要
鉛是一種重金屬，它會影響身體的各系統和器官，尤其是神經系統。鉛中毒可以導致兒童認知能力降低和行為學改變。目前針對鉛的神經毒性機制研究多集中於認知能力方面，尚無針對行為學改變機制的研究。於是，我們在體內和體外中分析了鉛對幼鼠行為學的影響和大腦中間神經元的作用。根據鉛暴露濃度，將小鼠分為三組：對照組、低劑量組和高劑量組。測定了幼鼠的行為學（由曠場實驗和懸尾實驗測量），血鉛含量（原子吸收分光光度法測定），GABA能中間神經元的數量（免疫組化檢測），Dlx基因表達水平（qRT-PCR檢測）及其DNA甲基化水平（用焦磷酸測序）。結果顯示鉛暴露使幼鼠血鉛水平顯著高於對照組（p＜0.001）。鉛暴露導致小鼠活動增加和體重減輕。鉛暴露組幼鼠的大腦皮層中PV和NPY中間神經元數量明顯減少和基因Dlx 1, 2, 5, 6表達降低。為了進一步明確Dlx基因表達減少的機制，我們選擇了GE6細胞系，它能夠分化成各種類型的GABA能中間神經元。在細胞實驗中，我們發現高水平的鉛也抑制了GE6細胞中Dlx 1/ 2/ 5/ 6的表達，但其DNA甲基化水平並沒有改變。此外，鉛暴露還能顯著降低Olig1和Ki67的表達，而增加Tubb3的表達。目前的研究表明，鉛暴露可能通過改變幼鼠GABA能中間神經元細胞的一些重要基因的表達導致GABA能中間神經元的數量減少，從而引起幼鼠的行為學改變。這些結果將為以後鉛中毒的研究打下堅實的理論基礎。
