《Dicer在先天性巨結腸發病中的作用機制研究》是依託山東大學，由劉偉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Dicer在先天性巨結腸發病中的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉偉
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
先天性巨結腸病（HSCR）被認為是一種腸神經系統發育異常疾病，各種原因引起的腸神經嵴細胞（ENCC）遷移、定植、分化的異常，均可造成這種畸形的發生。因此研究ENCC發育過程中的精細調控，是目前HSCR病因研究的一個重要方向。作為miRNA加工成熟過程中的關鍵酶Dicer已被證實在胚胎幹細胞發育、神經細胞分化、腫瘤細胞侵襲等過程中發揮重要作用，因此作為幹細胞的一個特殊類型，ENCC的生理活動可能也受到Dicer的調控。本課題組前期研究發現Dicer在HSCR患兒狹窄段腸壁中的表達明顯減低。因此本研究擬進一步研究Dicer在HSCR腸壁中的時空分布，並以ENCC為研究對象，套用基因轉染、siRNA干擾等技術，從組織-細胞-分子 3個層次，從定向遷移、增殖分化、信號通路等多個角度觀察了Dicer在腸神經系統發育中的調控作用和機制，證實其在HSCR發病中的作用，為HSCR的治療提供新的思路和靶點。
結題摘要
先天性巨結腸病（HSCR）是一種腸神經系統發育異常疾病，各種原因引起的腸神經嵴細胞（ENCC）遷移、定植、分化的異常，均可造成這種畸形的發生。因此研究ENCC發育過程中的精細調控，是目前HSCR病因研究的一個重要方向。作為miRNA加工成熟過程中的關鍵酶Dicer已被證實在胚胎幹細胞發育、神經細胞分化、腫瘤細胞侵襲等過程中發揮重要作用，因此作為幹細胞的一個特殊類型，ENCC的生理活動可能也受到Dicer的調控。本項目從Dicer入手，證實了Dicer蛋白在腸壁中的表達主要位於PGP9.5陽性肌間神經叢中並與PGP9.5表達具有一致性，Dicer在HSCR狹窄段中的表達明顯低於擴張段；在體外Dicer可促進腸神經嵴細胞的增殖、遷移，並能抑制其凋亡，在體內和體外Dicer可促進腸神經嵴細胞向nNOS神經細胞方向的分化，抑制Dicer的表達可降低腸神經運動功能恢復。為了進一步驗證Dicer在HSCR發病中的miRNA機制，經基因晶片及Real-time PCR篩選並驗證了HSCR狹窄段和擴張段中差異表達miRNA，集中研究了HSCR相關的下調錶達miRNAs，發現抑制miR-140-5p的表達可抑制腸神經嵴細胞的增殖和遷移、促進細胞的凋亡，抑制miR-9-5p的表達可抑制ENCC向神經細胞方向的分化，並根據生物學分析結果證實了miR-140-5p和miR-9-5p分別通過靶基因BMP2和CXCR4對腸神經嵴細胞進行調控。上述研究成果證實了Dicer和miRNA在腸神經系統發育中的調控作用和機制，為腸神經系統發育奠定了理論基礎，並為HSCR的早期干預提供全新的思路和靶點。
