《DevR-DevS雙組份系統在MDR-TB發生中的作用和分子機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由馬越雲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DevR-DevS雙組份系統在MDR-TB發生中的作用和分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：馬越雲
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
耐多藥結核分枝桿菌（MDR-TB）是結核菌(MTB)在長期動態濃度藥物環境壓力下耐藥相關基因突變的積累的結果。休眠是MTB耐受環境壓力的重要機制之一，但其在MDR發生中的作用及其分子機制尚不明確。鑒於DevR-DevS雙組份系統在調控MTB休眠中的作用，和我們前期試驗證明DevR在MDR-TB中的高表達，以及抗結核藥物可以誘導DevR表達增強的結果，我們提出DevR-DevS調控的休眠與復甦過程再循環的MDR發生模式。本研究將以構建DevR表達水平不同的MTB突變株為基礎，深入解析異煙肼、利福平對DevR-DevS表達和活化的調節作用；DevR介導的MTB潛伏、休眠狀態下的基因突變機制；MTB在體內外潛伏、休眠、復甦及該過程的再循環對耐藥基因突變率的影響；闡明檢測DevR表達水平對MTB耐藥狀態監測的意義，和抑制DevR表達以減少MDR發生的作用，為MDR-TB的防治提供新的策略。
結題摘要
耐多藥結核分枝桿菌（MDR-TB）是結核菌在長期動態藥物作用下耐藥相關基因突變的積累的結果。休眠是結核菌抵抗環境壓力的重要機制之一，是結核菌與動態藥物相互作用中的抗衡因素，但其分子機制，以及其與耐多藥發生的相互關係尚不明確。鑒於DevR-DevS雙組份系統在調控結核菌休眠中的作用，和我們前期試驗證明DevR在MDR-TB中的高表達，以及抗結核藥物可以誘導DevR表達增強的發現，我們假想認為，DevR調控的結核菌休眠於復甦的循環可能是產生MDR的重要模式。本研究建立了DevR敲除菌株，和休眠模型，進而完成了DevR/S與結核分枝桿菌耐藥的關係鑑定，發現了DevR、HspX和HBHA隨其休眠而高表達的情況；利用DevR敲除菌株和質譜分析，明確了DevR/S調控結核分枝桿菌耐多藥基因的關鍵分子節點，即HBHA；採用蛋白質譜、定量PCR等方法分析了DevR/S及其下游調控分子HBHA在臨床分離菌株中的存在和表達情況，證實了其在MDR-TB中的高表達；HBHA敲除H37Rv菌株已經建立成功，初步明確了其在結核耐藥中的作用，闡明了DevR/S-HBHA信號通路抑制肺泡上皮細胞核巨噬細胞自噬、促進細胞凋亡的作用。該研究明確了DevR/S與結核分枝桿菌耐多藥的相關性；初步揭示了DevR/S-HBHA引起結核分枝桿菌耐多藥的分子機制，闡明了DevR/S-HBHA對宿主細胞抗感染作用的影響。為開發以HBHA為靶點的抗耐藥研究和鑑別診斷活動/潛伏感染提供了新的理論依據。
