《Der p1/IgG融合蛋白對樹突狀細胞表型和功能調節及機制研究》是依託中山大學，由許庚擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Der p1/IgG融合蛋白對樹突狀細胞表型和功能調節及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：許庚
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
採用基因工程技術修飾疫苗是變應性疾病免疫治療研究的熱點問題。根據樹突狀細胞（DC）表面同時表達FcεRI（IgE受體）和FcγRIIb（IgG受體），以及FcεRI-抗原-FcγRIIb交聯能引發DC的免疫抑制性信號的研究報導，本課題擬採用IgG片段修飾變應原Derp1構建Derp1/IgG融合蛋白，觀察能否誘導DC形成耐受型表型從而抑制變應性炎症。同時，鑒於miRNA在免疫反應的調控中發揮重要作用且本課題組已證實多個miRNA參與並調控變應原誘導的DC成熟及功能。本課題擬分析Derp1/IgG誘導耐受型DC過程中miRNA的表達譜系，確定參與FcεRI和FcγRIIb受體及其交聯激活後引發信號的轉錄後調控的關鍵miRNA，闡明FcεRI和FcγRIIb交聯激活後對T細胞分化的影響和機理及其轉錄後調控機制，驗證Derp1/IgG在變應性鼻炎治療中的作用，用於未來變應性疾病的治療。
結題摘要
變應性鼻炎是一種Th2細胞優勢分化的黏膜慢性炎性病變，本課題檢測了中國人變應性鼻炎患者的臨床表型特徵，評估了變應性鼻炎患者外周血差異表達的miRNA；在此基礎上，採用IgG 片段修飾變應原Derp1 構建Derp1/IgG 融合蛋白，檢測了融合蛋白對樹突狀細胞表型的作用、Treg細胞的誘導作用及對變應性氣道炎症的抑制作用。並以miR-106b、miR-146a、miR-17等為研究靶點，探索miRNA在變應性鼻炎發病及免疫治療中的作用； 研究發現，證實中國南方的變應性鼻炎患者多數對一種以上的過敏原過敏，塵蟎是其中最主要的變應原；研究發現共刺激分子TIM-1 mRNA在變應性鼻炎患者表達增高，經過半年塵蟎舌下免疫治療後顯著降低，TIM-1 mRNA表達降低的情況與血漿IL-5、ECP濃度的降低直接相關；發現miR-146a在變應性鼻炎患者外周血PBMC顯著降低，經過3個月舌下和皮下塵蟎免疫治療後顯著增高，Treg 細胞數量增加，證實miR-146a可以作為變應性鼻炎免疫治療的重要參考指標；通過檢測了離體培養的樹突狀細胞在變應原OVA的刺激下miR-106b顯著下調，證實miR-106b能夠通過作用於EGR-2參與Th2反應的抑制過程，提示EGR-2可能是miR-106b調控變態反應發生的靶點；採用IgG 片段修飾變應原Derp1 成功構建了Derp1/IgG 融合蛋白，並予以表達、純化；通過融合蛋白刺激離體培養的樹突狀細胞，發現了一系列上調和下調的miR。發現融合蛋白刺激後的樹突狀細胞能夠誘導miR-146a依賴的Foxp3+ Treg細胞產生，而轉染miR-146a的樹突狀細胞對氣道炎症具有抑制作用；證實息肉組織中GSK-3β表達與Foxp3存在負相關，證實GSK-3β能通過磷酸化Foxp3調節Treg細胞的穩定性；證實了炎症條件下由IL-6/miR-17信號通路介導的一種非Foxp3依賴性Treg細胞免疫活性的調控機制，即miR-17通過負調控Eos在內的Foxp3相關共調節分子的表達而抑制Treg細胞抑制功能的發揮。整個研究從基因工程疫苗通過miRNA調節樹突狀細胞的層面上進一步拓展了學術界對變應性鼻炎發病機制，對提升免疫治療的臨床療效具有重要的意義。
